Injection de morpholino : une méthode pour inhiber l’expression génique cible afin d’étudier la fonction chez le poisson zèbre

- Une approche pour déterminer la fonction d’un gène consiste à inhiber son expression et à observer l’effet. Les oligomères morpholino sont souvent utilisés dans les études d’inactivation chez le poisson zèbre. Un morpholino est une molécule synthétique semblable à de l’ADN d’environ 25 bases de long, qui inhibe l’expression des gènes cibles.

Pour le traitement morpholino, placez un poisson anesthésié avec une nageoire caudale partiellement amputée sur une plaque d’injection et positionnez la plaque sous un stéréomicroscope. N’injectez que la face dorsale pendant que la face ventrale non injectée agit comme un contrôle. Les morpholinos peuvent fonctionner de deux manières en fonction de la séquence qu’ils ciblent. Tout d’abord, ils se combinent au site de début de traduction sur un ARNm et empêchent la synthèse des protéines en bloquant la traduction.

Deuxièmement, il peut se lier à la jonction intron-exon sur un pré-ARNm et empêcher un épissage correct, ce qui entraîne un transcrit défectueux qui sera dégradé par la cellule. Plus tard, examinez les nageoires caudales à la recherche d’excroissances. Les différences entre la repousse des régions traitées au morpholino et celles qui