0 vues • 3:11 min • April 30th, 2023
- Les neurones propagent des impulsions électriques via des potentiels d’action. Lorsque le neurone est à l’état de repos, il y a un flux plus lent d’ions potassium que l’afflux d’ions sodium, ce qui entraîne une modification du potentiel membranaire. Cela provoque l’ouverture des canaux ioniques sodium et permet l’afflux d’ions sodium, générant une impulsion électrique.
La méthode d’étude de ces activités dans une cellule s’appelle l’électrophysiologie. Commencez la procédure en insérant une pointe d’électrode secondaire dans la narine d’un poisson-zèbre adulte. Ensuite, insérez les électrodes primaires superficiellement, dans le tectum optique exposé, pour mesurer l’activité neuronale extracellulaire.
L’électrode primaire mesure le potentiel de membrane extracellulaire de toutes les cellules qui l’entourent. Le signal représente le potentiel membranaire combiné de toutes ces cellules. L’électrode détecte le signal et le transmet à un amplificateur - un oscilloscope - qui présente un affichage visuel du potentiel de la membrane, et à un ordinateur.
Observez les lectures et analysez la différence électrique entre les électrodes primaire et secondaire. La mesure électrophysiologique est une comparaison. Dans l’exemple de protocole, nous mesurerons l’effet de composés pharmacologiques sur l’activité neuronale chez un poisson zèbre adulte.
- Pour l’enregistrement électrophysiologique, fermez le robinet d’intubation et débranchez rapidement le verrou Leur reliant la base d’intubation à la goutte de tricaïne. Déplacez le dispositif d’intubation intact vers le microscope d’électrophysiologie et connectez-le au système de perfusion. Ouvrez l’eau de l’habitat et perfuser à un taux de 1 millilitre par minute pendant environ une heure, afin de laver la tricaïne.
À l'aide d'un micromanipulateur, positionnez l'électrode secondaire de manière à ce que l'embout de l'électrode puisse être inséré dans la narine de l'animal ou dans le creux sous la mâchoire supérieure. Par la suite, insérez l’aiguille de l’électrode primaire dans l’ouverture de la craniotomie. Ensuite, insérez l’aiguille dans le tissu, de sorte que l’extrémité soit positionnée assez superficiellement dans le tectum optique.
Des positions plus profondes de l’électrode peuvent entraîner un petit signal électrique. Pour la collecte de données, le mode sans espace à une fréquence d’échantillonnage de 5 000 hertz, associé au filtre passe-bas de 0,1 kilohertz et à un filtre passe-haut de 1 hertz, est utilisé. Commencer l’enregistrement de l’activité électrophysiologique lorsque l’eau de l’habitat a perfusé pendant au moins 45 minutes. Enregistrer une base de référence de l’activité native pendant au moins 15 minutes avant l’ajout de médicaments expérimentaux.