Microinjection d’embryons : une technique pour délivrer un composé dans le jaune de poisson-zèbre

- Placez deux poissons femelles et deux poissons mâles dans un réservoir d’élevage divisé une nuit avant l’injection. Le lendemain matin, retirez le séparateur et laissez les poissons se reproduire jusqu’à ce que vous observiez des œufs au fond de l’aquarium. Récupérez les œufs et lavez-les avec un milieu E3 contenant du bleu de méthylène, un fongicide. Observez les œufs au microscope et retirez les œufs non fécondés. Les œufs non fécondés ont une membrane vitelline transparente, tandis que les œufs fécondés ont une membrane jaune foncée.

Conservez 10 embryons dans une boîte de Pétri séparée en tant que témoins non injectés. À l’aide d’une pipette de transfert, alignez les embryons dans l’auge d’une plaque de micro-injection à température ambiante et placez-la sous le microscope. Poussez doucement l’aiguille de micro-injection à travers le chorion dans le jaune et injectez lentement un composé d’intérêt contenant un marqueur tel que le rouge de phénol. Le flux cytoplasmique permet au composé de se diffuser dans les cellules embryonnaires.

Après l’injection, cultivez les embryons dans un milieu E3 avec du bleu de méthylène à 28 degrés Celsius. Continuez à vérifier la santé des embry