Co-culture 3D avec interaction directe : co-culture de cellules cancéreuses avec des monocytes pour étudier leur interaction

Pour commencer, ajoutez du collagène DQ IV, un substrat protéique trempé par colorant fluorescent dans un extrait de matrice extracellulaire ou ECME. Versez cet extrait dans chaque puits d’une lame à deux puits. Étiquetez le premier bien comme co-culture, le second comme contrôle. Ajoutez une quantité appropriée de suspension de cellules cancéreuses marquées par fluorescence dans des puits et incubez la lame à 37 degrés Celsius pendant la durée souhaitée pour favoriser la fixation des cellules.

Ajoutez la quantité requise de suspension de cellules de monocytes dans le premier puits. Laissez l’ECME se solidifier à 37 degrés Celsius. Versez des ratios égaux de milieux de culture de cellules cancéreuses et de monocytes dans chaque puits et incubez la lame à 37 degrés Celsius pendant la durée souhaitée dans un environnement de dioxyde de carbone. Dans le puits de co-culture, les cellules cancéreuses sécrètent des protéines telles que les monocytes protéine chimioattractante pour attirer les monocytes.

En revanche, les monocytes produisent de la métalloprotéinase matricielle ou MMP, pour dégrader le collagène, favorisant ainsi l’invasion des cellules cancéreuses. Observez la lame au mic