Gonflage de l’encre de Chine : une méthode de coloration pour visualiser les nodules tumoraux

Commencez par placer une souris euthanasiée, côté ventral vers le haut, sur un lit chirurgical et fixez les membres de l’animal. À l’aide de ciseaux, coupez le long de la ligne médiane à travers la cage thoracique jusqu’aux glandes salivaires. Placez l’embout d’une pipette sous la trachée pour l’élever et l’isoler. Faites pivoter le lit chirurgical de 180 degrés. Insérez une aiguille de seringue contenant une tache d’encre de Chine dans la trachée et injectez l’encre dans les poumons jusqu’à ce que vous ressentiez une résistance.

Les cellules cancéreuses sécrètent une grande quantité d’acide lactique qui génère une forte charge négative à la surface des cellules. Lorsque ces cellules sont colorées avec de l’encre de Chine, une coloration acide, la surface cellulaire repousse la tache et reste non colorée.

Utilisez des ciseaux pour couper la trachée et glissez une pince à épiler sous les poumons. Retirez doucement les poumons du corps de l'animal. Rincez les poumons à l'eau et transférez-les dans un flacon contenant la solution de Fekete pour éliminer l'excès de coloration et fixer le tissu dans une hotte. Les nodules tumoraux apparaissent blancs sur le fond sombre.

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