Essai de formation de colonies de gélose molle : une méthode pour tester les effets de nouveaux composés sur la prolifération des cellules cancéreuses

Pour commencer, prenez une concentration appropriée d’agarose fondue dans un tube conique et ajoutez-y la quantité désirée de milieu de culture chaud. Retournez doucement pour mélanger le contenu. Ajoutez ce mélange dans chaque puits d’une assiette à six puits et laissez-le se solidifier. C’est la couche inférieure. Ensuite, traitez les cellules cancéreuses avec le composé d’intérêt et ajoutez la concentration requise d’agarose.

Maintenant, versez ce mélange contenant le nombre souhaité de cellules par millilitre dans chaque puits. Il s’agit d’une couche contenant des cellules. Une fois que le milieu se solidifie, incubez la plaque à 37 degrés Celsius pendant une semaine. Préparez une couche nourricière en mélangeant de l’agarose au milieu et complétez ce mélange avec le composé d’intérêt. Ajoutez délicatement cette couche d’alimentation dans chaque puits, laissez-la se solidifier et incubez la plaque à 37 degrés Celsius.

Répétez cette procédure d’alimentation chaque semaine pour reconstituer les cellules avec le milieu jusqu’à ce que des colonies se forment. Si le composé d’intérêt est un inhibiteur de la tumorigénicité, il supprimera la croissance des cellules, ce qui entraînera