Décellularisation des coussinets adipeux mammaires : dérivation d’hydrogels de matrice extracellulaire à partir de coussinets adipeux mammaires

Tout d’abord, placez des coussinets adipeux mammaires ou MFP dans une boîte avec une solution de trypsine-EDTA et incubez pendant la durée souhaitée pour briser les adhérences de la matrice cellulaire. Lavez les MFP avec de l’eau déminéralisée et passez-les à travers une passoire. Placez les mouchoirs dans un bécher à l’aide d’un agitateur et ajoutez le Triton X-100. Remuer pour lyser les cellules sans affecter les facteurs de croissance dans la matrice extracellulaire du tissu.

Filtrez les MFP et rincez-les à l’eau déminéralisée. Transférez les tissus dans le bécher et ajoutez de l’acide désoxycholique pour lyser les cellules restantes. Ensuite, filtrez les MFP et placez-les dans un bécher contenant de l’eau déminéralisée avec de la pénicilline-streptomycine pour éviter la contamination. Incuber le bécher à 4 degrés Celsius pendant la nuit.

Filtrez les MFP et placez-les dans un bécher contenant de l’éthanol et de l’acide peracétique. L'acide peracétique augmente la rigidité de la matrice extracellulaire du tissu. Remuez pendant un certain temps et répétez l’étape de filtrage. Lavez les MFP avec du PBS, puis avec de l’eau déminéralisée. Transférez les MFP filtrés dans un bécher con