Microréseaux d’anticorps : une technique pour étudier l’expression protéique de cellules cancéreuses du poumon traitées par des miARN

- Commencez par ajouter une solution de biotine et un tampon de marquage à l’échantillon de protéines. Incuber pour faciliter la fixation de la biotine aux protéines. Ajoutez un réactif d’arrêt et un vortex. Ensuite, placez une lame de microréseau d’anticorps dans une boîte contenant un réactif bloquant pour empêcher la liaison non spécifique des anticorps. Lavez la lame avec de l’eau distillée deux fois pour éliminer la solution de blocage. Placez la lame de la puce dans une chambre. Mélangez l’échantillon de protéines biotinylées avec une solution de couplage et ajoutez-le sur la lame pour faciliter la liaison des protéines cibles à leurs anticorps correspondants. Transférez la lame dans un plat contenant un tampon de lavage et remplacez le tampon par de l’eau distillée doublement. Ensuite, placez la lame dans un tampon de détection contenant de la streptavidine marquée par fluorescence pour favoriser sa liaison aux protéines biotinylées.

Incuber la parabole dans l’obscurité pour maintenir l’intensité de la fluorescence. Retirez la lame et placez-la dans un scanner de microréseaux. Le scanner recherche des signaux fluorescents provenant de la streptavidine liée à la protéine cibl