Encyclopédie des expériences JoVE
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0 vues • 4:11 min • April 30th, 2023
- Le test de formation de colonies est une analyse in vitro d'un médicament anticancéreux sur la croissance de la cellule cancéreuse, proliférant et se différenciant en colonies dans des milieux semi-solides. Pour commencer, ensemencez les cellules cancéreuses dans le milieu RPMI avec un supplément de croissance - sérum fœtal bovin, ou FBS, et antibiotique. Incuber les cellules pendant la durée requise.
Ensuite, collectez la concentration souhaitée de cellules dans un tube à microfuge et centrifugez. Remettez le granulé en suspension dans le PBS. Préparez un milieu à base de méthylcellulose et distribuez-le dans différents tubes avec FBS pour favoriser une croissance optimale.
Ajoutez une quantité appropriée de suspension cellulaire dans des tubes et vortexez-les pour mélanger les cellules avec le milieu. Ensuite, ajoutez des composés anticancéreux dans des tubes et préparez un contrôle en ajoutant du DMSO. Tubes vortex.
Ajoutez ce mélange de cellules dans la plaque de culture et incubez pendant la durée souhaitée. Après l’incubation, ajoutez du bromure de méthylthiazol diphényltétrazolium, ou MTT, et incubez pendant un certain temps. Le MTT réduit le sel jaune de tétrazolium dans
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