Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 4:17 min • April 30th, 2023
- Tout d’abord, placez une tranche de tissu sur un papier filtre imbibé de PBS pour éviter le rétrécissement ou l’enflure des cellules en équilibrant l’osmolarité. Transférez le tissu dans une cassette histo. Fermez et placez la cassette dans une solution de formol neutre et tamponné. Le FBN contient du formaldéhyde qui se lie aux groupes aminés d’acides aminés et empêche la formation d’acide formique qui pigmente le tissu. Laissez la cassette toute la nuit à basse température, ce qui empêche la dégradation des acides nucléiques et fixe les tissus. Déshydratez le tissu avec plusieurs lavages d’alcool.
Placez-le dans de la paraffine liquide et appuyez dessus jusqu'au fond du moule. Retirez le poids et placez le bas de la cassette histo sur le tissu. Versez de la paraffine liquide sur l’ensemble. Laissez la configuration se solidifier sur une plaque froide. La paraffine est insoluble dans l’eau et, après avoir pénétré dans les tissus déshydratés, elle durcit et aide à la section. Transférez le bloc de tissu sur un microtome. Coupez et collectez de fines sections du tissu sur une lame. Si la section est trop épaisse, l’oxygène et les autres nutriments ne peuvent pas se diffuser à trav
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