Imagerie de la dynamique calcique dans les cellules pancréatiques : une technique pour étudier les changements en temps réel de la concentration de calcium cytosolique dans les îlots pancréatiques

- Les îlots pancréatiques sont un amas de cellules pancréatiques productrices d’hormones qui jouent un rôle crucial dans le maintien de l’homéostasie du glucose. Une concentration élevée de glucose déclenche la fermeture des canaux ioniques potassiques, empêchant l’efflux d’ions potassiques, entraînant une dépolarisation membranaire. En conséquence, des canaux d’ions calcium voltage-dépendants s’ouvrent, permettant l’afflux d’ions calcium. Cette concentration accrue de calcium cytosolique stimule la libération d’hormones comme l’insuline. En temps réel, pour imager la dynamique cytosolique du calcium, transférez quelques îlots chargés d’un colorant indicateur de calcium approprié entre les parois d’espacement d’un maillage fin préassemblé.

Positionnez le treillis à l’envers sur une lamelle placée à l’intérieur de la chambre d’imagerie d’un microscope inversé. Placez un maillage grossier et un poids pour immobiliser les cellules. Ajoutez la solution d’imagerie dans la chambre. Ensuite, mettez en place un système de perfusion pour introduire du glucose ou une hormone de test d’intérêt. À l’intérieur des cellules, des indicateurs de calcium fluorescents préchargés signalent toute augm