Greffe de tumeur orthotopique par homogreffe : une technique pour générer des modèles murins de tumeurs pancréatiques

- Lors d’une greffe tumorale par homogreffe orthotopique, des cellules tumorales ou des fragments de tumeur provenant d’un donneur cancéreux sont transplantés chez un receveur appartenant à la même espèce au niveau d’un organe ou d’un site correspondant à l’histotype de la tumeur. Commencez par prélever une souris donneuse anesthésiée porteuse d’une tumeur, contenant des cellules d’origine pancréatique. Stérilisez la zone et récoltez chirurgicalement la tumeur. Lavez le tissu pour enlever le sang et coupez-le en fragments. Ensuite, placez une souris receveuse anesthésiée dans une position latérale droite et stérilisez sa région abdominale. Exposer chirurgicalement la rate.

Ensuite, retirez doucement une partie du pancréas sous la rate. Placez le fragment de tumeur sur le pancréas et suturez-les ensemble. Fermez l’abdomen et laissez la souris récupérer dans une cage. Surveillez quotidiennement la souris receveuse pour observer la croissance de la tumeur pancréatique orthotopique. Dans le protocole suivant, nous montrerons la transplantation orthotopique d’une homogreffe d’adénocarcinome canalaire pancréatique d’une souris donneuse C57 black 6 dans le pancréas d’une souris receveuse C57 black 6.

- Surveillez le poids corporel des souris C57 black 6 à l’aide d’une balance. Surveillez également le volume tumoral des souris donneuses porteuses de tumeurs par mesure de l’étrier. Après l’euthanasie de l’animal dans une cagoule à risque biologique conformément au protocole, stérilisez la peau autour de la tumeur à l’aide d’écouvillons à l’iodophore. Après avoir enlevé chirurgicalement la tumeur comme détaillé dans le protocole de texte, placez la tumeur dans une boîte de Pétri contenant 20 millilitres de PBS qui a été pré-refroidie à quatre degrés Celsius. S’il y a du sang contaminant, transférez la tumeur dans une autre boîte de Pétri et lavez la tumeur avec du PBS.

Coupez la tumeur en deux. Retirez toute peau supplémentaire, vaisseaux, calcification et/ou nécrose. Choisissez uniquement des morceaux intacts de tumeur et placez-les dans un tube à centrifuger stérile de 50 millilitres. Ajoutez 20 millilitres de PBS avant de transporter le tube dans une salle animalière séparée pour les études pharmacologiques. Pour préparer l’implantation orthotopique, fixez la souris entièrement anesthésiée sur une planche d’expérimentation dans la position latérale droite. Désinfectez la peau autour de la rate avec de l’iode, puis déiodinez avec de l’alcool éthylique à 75 %.

Trouvez le point moyen de la rate et faites une incision verticale d’un centimètre sur l’abdomen pour exposer la rate. Prélevez doucement une partie du tissu pancréatique sous la rate à l’aide d’une pince à épiler à bout plat et suturez un morceau de tumeur homogreffée de souris de la souris graine sur le pancréas de la souris receveuse par une suture chirurgicale résorbable 9-0. Fermez l’abdomen avec une suture en soie 6-0 par double couture. Atteindre l’homéostasie par compression.

Après avoir terminé l’implantation de la tumeur, gardez les animaux dans une cage chaude tant qu’il n’y a pas de saignement ou de fuite de tissu tumoral. Surveillez l’animal jusqu’à ce qu’il reprenne une conscience suffisante pour maintenir le décubitus sternal. Retournez l’animal dans la salle animalière après s’être complètement rétabli de l’anesthésie. Surveillez les souris porteuses de tumeurs en palpant l’abdomen près de la rate et sélectionnez les souris porteuses de tumeurs orthotopiques.

• Orthotopic Homograft Transplantation - Procedure of transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient at a corresponding organ.
• Pancreatic Cancer Homograft Models - Scientific models used for studying pancreatic cancer by transplanting tumor homografts.
• Orthotopic - Refers to the transplantation of cells or tissues into their natural site of occurrence in the body.
• Tumor Homograft Models - Research models involving the transplantation of tumor tissues between same-species subjects.
• Mouse Cancer Models - Laboratory mice bred or genetically engineered for use in cancer research.

• Introduce Orthotopic Homograft Transplantation – This procedure involves transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient (e.g., mouse tumor).
• Key Concepts – Pancreatic Cancer Homograft Models allow us to study pancreas cancer progression (e.g., tumor mouse models).
• Underlying Mechanisms – Transplantation is done at matching organ site for accurate reflection of cancer progression.
• Connect to Experiment – The procedure mentioned is used to establish a mouse model for studying pancreatic cancer progress.

• Practical Applications – Allows for accurate representation of cancer progression enhancing research (e.g., tumor mouse model).
• Industry Impact – Impact on medical and biotechnological sectors (e.g., healthcare).
• Societal Importance – Enhances understanding of cancer which could lead to better treatments (e.g., health).
• Link to Scientific Advancements – Establishes a platform for scientific research and innovations in cancer treatment.