Électroporation irréversible : une technique d’ablation d’une tumeur pancréatique chez la souris

- L’électroporation irréversible ou IRE est une technique d’ablation des tumeurs pancréatiques en administrant des impulsions courtes et à haute tension de courant électrique à la tumeur, causant des dommages permanents aux cellules tumorales. IRE a une sélectivité et une accessibilité élevées pour la zone tumorale cible. Il ne cause pas de dommages induits par la chaleur aux cellules saines voisines, ce qui en fait une thérapie antitumorale prometteuse.

Commencez par placer une souris anesthésiée sur le côté et disséquez sa cavité abdominale pour localiser la tumeur à la surface du pancréas. Ensuite, utilisez les électrodes, en encadrant le site de la tumeur, et administrez des impulsions ciblées de courant électrique pendant la durée souhaitée. Le courant électrique au-delà d’un certain seuil, provoque des pores permanents dans la membrane cellulaire des cellules tumorales, empêchant la cellule de revenir à l’état d’homéostasie.

Ces pores font sortir le contenu intracellulaire de la cellule, entraînant ainsi une mort cellulaire progressive par apoptose. Maintenant, fermez la cavité abdominale et laissez la souris récupérer dans la cage de la maison. Enfin, surveillez le pancréas pour la réduction de la taille de la tumeur, après l’électroporation. Dans le protocole suivant, nous démontrerons une méthode permettant d'effectuer une électroporation irréversible pour perturber les tumeurs pancréatiques de souris.

- Avant que la tumeur n’atteigne 6 millimètres de diamètre, placez l’animal anesthésié sur son côté droit pour permettre l’accès à la tumeur et utilisez une tondeuse et un tampon d’alcool pour nettoyer le site de la tumeur. À l’aide d’une pince, élevez la peau directement sous la tumeur et insérez deux électrodes à aiguille à travers la peau, parallèlement au corps pour encadrer la tumeur, en veillant à ce que les électrodes ne pénètrent pas dans la cavité péritonéale.

Réglez l’électroporateur pour qu’il délivre des impulsions de 100 microsecondes, à une fréquence de 1 Hertz, à 1 500 volts par centimètre pour un total de 150 impulsions et utilisez la pédale pour délivrer les impulsions, en séparant chaque série de 10 impulsions par 10 secondes pour permettre la dissipation de chaleur entre chaque série d’impulsions.

- Comme les contractions musculaires se produisent pendant l’administration de l’IRE et sont plus prononcées lors de la première série d’impulsions, assurez-vous que les électrodes sont toujours à l’endroit souhaité et que l’animal est toujours sous sédatif après chaque série d’impulsions.

- Après pas plus de 200 secondes de dosage, retirez les électrodes et enregistrez la tension réelle délivrée telle qu’affichée sur l’électroporateur. Ensuite, remettez la souris dans sa cage. Pour l’IRE d’une tumeur orthotopique, 8 à 10 jours après l’implantation de la tumeur, utilisez une pince à bec émoussé pour externaliser la tumeur avec la pince et capturez étroitement la tumeur avec les électrodes de platine de la pince à épiler.

Délivrez les impulsions d’électroporation comme cela vient d’être démontré, en maintenant la tumeur extériorisée pour la dernière série d’impulsions pendant au moins 60 secondes pour surveiller tout signe d’hémorragie. Ensuite, ramenez la tumeur dans la cavité abdominale et fermez l’incision comme démontré, en surveillant l’animal jusqu’à ce qu’il soit complètement rétabli.