Modèle expérimental de mélanome métastatique : une plateforme pour étudier le potentiel métastatique des cellules de mélanome dans les poumons

- Des modèles expérimentaux de métastases permettent d’évaluer le potentiel des cellules tumorales à extravaser et à proliférer dans des sites particuliers après une injection intravasculaire. Pour commencer, préparez une suspension unicellulaire de cellules de mélanome à la concentration souhaitée à l’aide d’un milieu approprié. Chargez la suspension dans une seringue.

Ensuite, retenez une souris dans une chambre et fixez-la de manière à ce que sa queue soit accessible. Faites pivoter la souris de 90 degrés pour visualiser sa veine latérale. Utilisez une lampe chauffante pour augmenter la température ambiante afin de dilater la veine de la queue. Maintenant, insérez l’aiguille vers l’extrémité distale de la queue et injectez la suspension de cellules de mélanome préparée dans la veine dilatée.

Les cellules tumorales métastatiques injectées migrent dans le système circulatoire. Finalement, certaines de ces cellules extravasent de la circulation vers des organes éloignés comme les poumons. Ces cellules tumorales s’adaptent à leur nouveau microenvironnement pour proliférer et établir des foyers métastatiques expérimentaux.

Dans le protocole suivant, nous démontrerons l’injection dans la veine caudale de cellules de mélanome B16-BL6 dans un modèle murin pour étudier leur potentiel métastatique.

- Une fois que toutes les suspensions de cellules B16-BL6 ont été préparées, sélectionnez une souris. En le tenant par la queue, guidez l’animal, par l’arrière en premier, dans un dispositif de contention. Lorsque le torse de la souris est dans la chambre principale et sa queue à l'extérieur de l'appareil, tirez l'animal vers l'extrémité du dispositif de contention.

Ensuite, insérez le piston de retenue et continuez à pousser sur le piston jusqu’à ce que la souris soit bien fixée. Une fois l’animal en place, faites pivoter la souris de 90 degrés de sorte que l’une des veines latérales de la queue soit tournée vers le haut. Ensuite, utilisez un tampon imbibé d'alcool pour nettoyer vigoureusement le côté de la queue de la souris où la veine est la plus visible.

Pour préparer l’injection, prélevez d’abord 300 microlitres de la suspension de 0,5 million de cellules par millilitre dans une seringue. Ensuite, éjectez les bulles de la seringue en la renversant, en effleurant son côté et en poussant le piston. Une fois les bulles éliminées, éjectez la culture cellulaire pour obtenir un volume final de 250 microlitres dans la seringue.

Procédez à l’extension de la queue de la souris avec la main non dominante. Tenez-le de manière à ce que l’index élève l’extrémité proximale de la queue et que le pouce enfonce la partie distale. Avec la main dominante, insérez l’aiguille dans la veine vers l’extrémité distale de la queue, à un angle minuscule vers le bas. Ensuite, insérez davantage l’aiguille en l’ajustant de manière à ce qu’elle corresponde à l’angle de la veine de la queue.

Une fois l’aiguille insérée, à environ 1 centimètre dans la veine de la queue, commencez à pousser le piston tout en maintenant la seringue stable. Arrêtez tout saignement en tenant de la gaze contre le site d’entrée. Une fois la suspension cellulaire éjectée, retirez l’aiguille de la veine et jetez-la. Ensuite, retirez le piston de la retenue et placez la souris dans une cage réceptrice.

• Experimental metastasis models - Tools to evaluate tumor cells' propensity to extravasate and proliferate following intravascular injection.
• Melanoma - A potent type of skin cancer that can spread to other organs like the lungs.
• B16-BL6 melanoma cells - Specific melanoma cells used in research for their metastatic potential.
• Tail vein injection - Technique to introduce substances directly into the bloodstream for experimental purposes.
• Metastatic foci - The sites where cancer cells adapt, proliferate and establish after traveling from the original tumor site.

• Melanoma metastasis - This describes how melanoma cells spread from the primary site to other parts of the body (e.g., lungs).
• Basics of tail vein injection - This procedure is a method of administering substances directly into the bloodstream (e.g., B16-BL6 melanoma cells).
• Metastatic foci formation process - This describes how injected cancer cells adapt to new environments, leading to metastasis.
• Link to mouse model - B16-BL6 melanoma cells are injected into a mouse model to study their metastatic potential.

• What is melanoma and how does it metastasize to the lungs?
• What is the purpose of tail vein injection in the metastatic model?
• How do melanoma cells form metastatic foci in distant organs?

• Targeted cancer treatments - Understanding metastasis could guide development of targeted therapies (e.g., for melanoma).
• Cancer research - The B16 mouse model aids in understanding cancer spread (e.g., melanoma metastasis).
• Medical advancements - Learning about metastasis contributes to treating other metastatic cancers (e.g., lung metastasis).
• Innovations in metastasis study - The study of metastasis helps in improving cancer diagnosis and prognosis methods.