December 18th, 2010
Le Colon ascendens stent péritonite (CASP) est un modèle très standardisé pour le sepsis abdominaux polymicrobiennes chez les rongeurs. Cet article décrit la procédure chirurgicale de l'ACPS. Le modèle du PCRS et ses variantes permettent l'investigation systématique des différents problèmes concernant le sujet de la septicémie.
L’objectif global de cette procédure est de générer une septicémie abdominale en insérant un stent dans le côlon ascendant d’une souris. Ceci est accompli en préparant d’abord le côlon ascendant. Ensuite, une canule adaptée est insérée dans le côlon, puis fixée en place.
Enfin, l’endoprothèse est retirée et le côlon est remis dans la cavité péritonéale. En fin de compte, il est possible d’obtenir des résultats qui montrent une septicémie en mesurant les cytokines et le nombre de bactéries dans le plasma. Le principal avantage de cette technique par rapport aux méthodes existantes telles que la drépanocytose et la ponction, est que l’epsis et la mortalité peuvent être titrés en fonction de la taille du support inséré.
Donc, en général, les personnes qui sont nouvelles dans cette méthode, elles pourraient avoir des difficultés parce que les techniques microchirurgicales ont besoin d’un peu de pratique. Jusqu’à ce qu’une performance parfaite puisse être fournie, commencez par anesthésier la souris avec une injection intrapéritonéale de liquide narcotique et placez l’animal en position couchée. Les pieds de la souris doivent être fixés avec du ruban adhésif sur la plaque pour assurer une position stable de l’animal pendant l’opération.
Pour cette procédure, adaptez une canule IV, qui est couramment utilisée pour les injections IV chez l’homme et sculptez ses tubes en plastique. Circulairement à deux millimètres de son extrémité après une désinfection complète de la peau abdominale de la souris, inciser le long de sa ligne médiane d’environ 15 millimètres. Ouvrez la caverne péritonéale en incisant les muscles abdominaux et le péritoine le long de l’alba linéaire.
Identifiez le pôle de séquelle et utilisez des cotons-tiges pour retirer soigneusement l’iléon terminal secum et le côlon ascendant de l’abdomen. 15 millimètres distaux de la valve iléo-caecale ont percé la paroi du côlon ascendant avec une suture de sept oh. Fixez la suture sur la paroi du côlon avec deux nœuds chirurgicaux.
Percez le côlon ascendant avec une canule préparée. Un à deux millimètres proximaux des sept points de suture. Insérez délicatement la canule dans le côlon jusqu’à ce que le sillon et le tube en plastique soient au niveau du cire.
Placez les extrémités libres des sept points de suture autour de la canule et placez un double nœud exactement dans le sillon préparé du tube en plastique. Prenez l’aiguille de la suture sept oh et cousez-la consécutivement à travers la paroi anti-mésentérique du côlon. Effectuez deux nœuds chirurgicaux pour fixer en outre le tube en plastique et la paroi colique.
Coupez les extrémités des sutures. Récupérez un peu la partie en fer de la canule et coupez le tube en plastique près de la suture de fixation 7.0. Maintenant, trayez soigneusement les selles du caecum vers l’endoprothèse du côlon à l’aide de cotons-tiges jusqu’à ce qu’une petite pointe de selle apparaisse sur le dessus de l’endoprothèse.
Remettez l’intestin dans la caverne péritonéale et effectuez une réanimation liquidienne par administration intrapéritonéale de 0,5 millilitre de solution saline. Fermez le péritoine avec une suture continue. Fermez la peau avec des sutures uniques pour l’analgésie.
L’administration sous-cutanée d’une substance analgésique puissante comme la buprénorphine doit être effectuée si nécessaire, remettre l’animal dans sa cage, qui doit contenir de la nourriture et de l’eau. Cinq heures après le casp, préparez et anesthésiez à nouveau la souris pour effectuer l’intervention opérationnelle sur l’animal. Ouvrez les sutures de la paroi abdominale.
Retirez le côlon ascendant avec l’endoprothèse insérée, coupez soigneusement les sutures fixant l’endoprothèse et retirez l’endoprothèse. Fermez le défaut du côlon avec des sutures simples inversées. Remettez l’intestin dans la cavité abdominale et rincez l’échelle deux fois avec cinq millilitres de solution saline.
Fermez le péritoine avec une suture continue. Fermez la peau avec des sutures uniques pour l’analgésie. Effectuez régulièrement l’administration sous-cutanée d’une substance analgésique puissante.
Remettez l’animal dans sa cage avec suffisamment de nourriture et d’eau dans les deux premiers jours suivant l’opération. Surveillez les animaux toutes les six heures dans les quelques heures suivant l’opération CASP, les animaux présentent des signes cliniques d’un début de septicémie Les taux de survie après la chirurgie CASP dépendent du diamètre de l’endoprothèse insérée. Le CASP de calibre 14 entraîne un taux de mortalité de 100 %Le CASP de calibre 16 entraîne une mortalité de 70 % et le CASP de calibre 18 entraîne une mortalité de 50 %.
Le CASP simulé est associé à une survie de 100 %L’issue du CASP dépend de la période de temps. Après le casp, lorsque le stent est retiré, une intervention trois heures après le CSP entraîne un taux de survie de 45 %Si le stent est retiré cinq heures après le csp, seulement 10 % des animaux survivent à la procédure. Le retrait d’un stent après neuf heures entraîne une mortalité de 100 % de CASP simulé par rapport à 100 % de survie.
L’inspection macroscopique de la sitis abdominale 24 heures après la CSP montre des signes typiques de péritonite, d’œdème, de vasodilatation, d’arithmatique, de paroi intestinale, de démarcation nette des plaques de pires, de paralysie intestinale, de liquide libre et de sécrétion septique. L’infection systémique peut être mise en évidence par une analyse bactériologique 12 heures après la csp. Des quantités massives de bactéries peuvent être détectées dans le lavage péritonéal, le sang, le foie, les poumons, la rate et les reins.
Le sepsis induit par le CSP se manifeste par une libération locale et systémique de cytokines et de chimiokines pro et anti-inflammatoires. 12 heures après le CSP, des quantités significatives de T-N-F-I-L one beta IL six IL 10 MCP one et d’autres peuvent être mesurées par Eliza dans le sang, mais aussi dans les surnageants des suspensions d’organes tels que le foie, les poumons, la rate et les reins. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en 10 minutes si elle est exécutée correctement.
Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de générer une septicémie abdominale avec les modèles de SSP et SSP avec intervention. C’était tout. Merci d’avoir regardé et bonne chance dans vos expériences.
Le modèle de Péritonite avec Stent du Côlon Ascendant (CASP) est une méthode standardisée pour induire une septicémie abdominale polymicrobienne chez les rongeurs. Cet article détaille la procédure chirurgicale impliquée dans la création du modèle CASP, qui facilite l'investigation des problèmes liés à la septicémie.
The Colon Ascendens Stent Peritonitis (CASP) model provides a standardized, reproducible system for studying polymicrobial abdominal sepsis, enabling mechanistic de-risking of therapeutic candidates in preclinical sepsis research. By allowing titration of disease severity through stent diameter and intervention timing, the model supports target validation and predictive confidence in immunomodulatory and anti-infective drug development. This positions CASP as a disease-relevant system for evaluating host-pathogen interactions and inflammatory cascades in translational biomarker discovery.
The CASP model fits within the discovery continuum from target validation to preclinical efficacy testing, particularly for sepsis-modulating therapies where mechanistic de-risking and predictive confidence are critical.