Injection stéréotaxique de virus pour une modification génétique stable dans un modèle murin

Commencez avec une souris anesthésiée avec un crâne exposé dans un cadre stéréotaxique.

Abaissez le porte-seringue jusqu’à ce que la pointe de l’aiguille s’aligne avec le bregma, un point de référence du crâne.

À l’aide des coordonnées stéréotaxiques prédéterminées, localisez la zone ventriculaire-sous-ventriculaire ou

V-SVZ, une niche neurogène contenant principalement des cellules souches neurales ou NSC, et marquez cette région.

Retirez la seringue et percez soigneusement un petit trou, évitant ainsi les lésions cérébrales.

Remplissez une seringue stérile de virus porteurs du transgène et placez l’aiguille sur la surface du cerveau.

Repositionnez la seringue et abaissez-la jusqu’à ce que l’embout touche la couche superficielle la plus interne du cerveau.

Pénétrez dans le cerveau pour atteindre le V-SVZ, injectez lentement le virus, maintenez brièvement, puis retirez la seringue.

Dans la V-SVZ, le virus pénètre dans les NSC par fusion membranaire. Son ARN inverse se transcrit en ADN.

Cet ADN s’intègre ensuite dans le génome des NSC, permettant une modification génétique stable des NSC.

Après l’anesthésie, une souris de six à huit semaines rase la zone entre ses oreilles. Ensuite, désinfect