Name: Micro-dissection du cerveau de rat pour lARN ou de lextraction de protéines à partir région spécifique du cerveau (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-08-30T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 31 s
Description: Apprenez la micro-dissection du cerveau de rat pour extraire l'ARN et les protéines de régions spécifiques comme le bulbe olfactif, le cortex frontal, le striatum et l'hippocampe. Cette méthode préserve l'intégrité des échantillons pour la recherche en neurosciences.

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Etape 1 Sacrifice du rat selon des protocoles établis. Enlever le cerveau du crâne et de le rincer dans de la glace froide DEPC traitées eau Milli Q pour enlever toute trace de sang de surface. Etape 2 Placer sur une plaque de métal froid. Couper le cerveau bi-moitié dans l&#39;hémisphère droit et gauche. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_3/269_Figure-01.png" alt="269_Figure-01" width="474" height="224" /> Figure 1. Les positions de coupe de la vue médiale de l&#39;hémisphère rat Étape 3 Recueillir le bulbe olfactif à droite après la première coupe. Flash geler l&#39;échantillon dans l&#39;azote liquide et conserver à -80 ° C. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_4/269_Figure-02.png" alt="269_Figure-02" width="564" height="145" /> Figure 2. Dissection bulbe olfactif Etape 4 Recueillir le droit cortex frontal après la deuxième coupe, en utilisant une lame et une Dumont n ° 5 forceps. Flash geler l&#39;échantillon dans l&#39;azote liquide et conserver à -80 ° C. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_5/269_Figure-03.png" alt="269_Figure-03" width="566" height="220" /> Figure 3. Frontale du cortex de dissection Etape 5 Recueillir le striatum (noyau caudé) juste après la troisième coupe à l&#39;aide de deux pinces No.5 Dumont. Flash geler l&#39;échantillon dans l&#39;azote liquide et conserver à -80 ° C. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_6/269_Figure-04.png" alt="269_Figure-04" width="555" height="208" /> Figure 4. Striatum (noyau caudé) la dissection Etape 6 Pour recueillir l&#39;hippocampe, placez la face ventrale du cerveau et puis retirez du mésencéphale pour exposer l&#39;hippocampe. Disséquer l&#39;hippocampe du cortex en utilisant deux pinces Dumont n ° 5. Flash geler l&#39;échantillon dans l&#39;azote liquide et conserver à -80 ° C. <img src="/files/ftp_upload/old/269_2008_7_19_7/269_Figure-05.png" alt="269_Figure-05" width="559" height="191" /> Figure 5. Dissection Hippocampus

<ol><li>Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).</li>
<li>Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).</li>
</ol>

Les animaux ont été traités selon le protocole pour l&#39;utilisation des animaux dans la recherche approuvée par le Comité sur l&#39;utilisation d&#39;animaux vivants dans l&#39;enseignement et la recherche (CULATR) à l&#39;Université de Hong Kong et selon le National Institutes of Health des lignes directrices pour l&#39;utilisation des animaux.

Différentes régions du cerveau associée aux différentes maladies neurodégénératives. Par exemple, le cortex frontal et le striatum se rapportent à la maladie de Parkinson alors hippocampe concerne la maladie d&#39;Alzheimer. Précis de micro-dissection du cerveau nous permet de détecter les changements ARNm et la protéine dans la région de malades avec plus de précision.

<table><tbody><tr><td>Microscope</td><td>Olympus Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Outils de dissection</td><td></td><td></td><td>Plaque métallique, pinces, lame, etc. Emballés individuellement dans du papier d’aluminium et chauffés à 180 °C pendant huit heures pour éliminer les RNases. Refroidis sur glace avant utilisation.</td></tr></tbody></table>

micro-dissection du cerveau de rat pour l&#39;arn ou de l&#39;extraction de protéines à partir région spécifique du cerveau

Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region

Micro-dissection du cerveau de rat dans différentes régions est extrêmement important pour l&#39;étude de différentes maladies neurodégénératives. Cette vidéo montre des micro-dissection des quatre régions du cerveau majeurs comprennent bulbe olfactif, le cortex frontal, le striatum et l&#39;hippocampe dans les tissus de cerveau de rat frais. Conseils utiles pour un retrait rapide des régions respectives afin d&#39;éviter la dégradation de l&#39;ARN et des protéines du tissu sont donnés.

Micro-dissection du cerveau de rat pour l&#39;ARN ou de l&#39;extraction de protéines à partir région spécifique du cerveau

La micro-dissection du cerveau de rat en diverses régions est extrêmement importante pour l'étude de différentes maladies neurodégénératives. Cette vidéo démontre...

Bonjour, je suis Quint du Département d'anatomie de l'Université de Hong Kong. Aujourd'hui, je vais présenter comment disséquer au microscope le cerveau rouge en quatre voies principales : le cortex préfrontal, le striatum et l'hippocampe. Voici une image schématique montrant comment nous disséquons le cerveau.Il y a trois coupes. Le premier plan de coupe se situe au niveau de la jonction entre le bulbe olfactif et le cortex frontal. Le deuxième plan de coupe se situe au niveau du genou du corps calleux.Le troisième plan de coupe se situe à l'extrémité antérieure des pho­niques. Après trois coupes, il y aura quatre trajets cérébraux. À gauche se trouve un facteur.À droite se trouve l'hippocampe. Le cortex frontal est situé entre la première et la deuxième coupe. La nucléase codante, qui fait partie du stratum, se trouve entre la deuxième et la troisième coupe sur l'hémisphère cérébral frais.Il est très important de reconnaître d'abord le corps calleux et les voies optiques. Ensuite, nous pouvons facilement localiser les trois coupes. Le premier plan de coupe se situe au niveau de la connexion entre le bulbe olfactif et le cortex frontal.Le deuxième plan de coupe se situe à une ion

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Le profilage de l'expression de l'ARN de régions cérébrales murines discrètes nécessite une stratégie de collecte de tissus précise et reproductible. Un protocole utilisant à la fois la section coronale du cerveau et la microdissection assistée par un carottier tissulaire est décrit ici. Le rendement et la qualité de l'ARN total obtenu à partir des échantillons résultants confirment l'utilité de la méthode décrite.

Approche non-Laser Microscopie Capture pour la microdissection des régions discrètes du cerveau de souris pour l&#39;ARN isolement total et en aval séquençage de nouvelle génération et de profil d&#39;expression génique

Nous décrivons un modèle de rat de trouble de stress post-traumatique (SSPT) qui révèle les altérations persistantes dans la fonction neuroendocrine et le retard à long terme, l'intervention crainte exagérée, caractéristiques des patients SSPT. Le modèle animal et les méthodes décrites ici sont utiles pour corréler des biomarqueurs dans les noyaux du cerveau, qui sont mécaniste, mais ne peut pas être mesurée chez les patients avec des biomarqueurs en globules blancs périphériques, ce qui peut.

Biomarqueurs dans un modèle animal pour Révéler Corrélats neuronaux, hématologiques et du comportement de stress post-traumatique

Cette vidéo montre le processus d’isolement des microvaisseaux cérébraux des rats euthanasiés. Il comprend la dissection du cerveau, le nettoyage des tissus et la digestion mécanique, suivie d’une centrifugation répétée pour isoler la fraction pure des microvaisseaux.

Procédé d’isolement d’unités neurovasculaires à partir du cerveau de rat

Cette vidéo démontre la détection de la synthèse de l’ARN du récepteur de la sérotonine à l’aide de sondes oligonucléotidiques dans le tissu cérébral du rat affecté par le syndrome sérotoninergique. Le protocole comprend le prétraitement tissulaire, l’hybridation de sondes et la détection enzymatique pour visualiser et quantifier l’expression de l’ARN du récepteur de la sérotonine au microscope.

Hybridation in situ à l’aide de sondes oligonucléotidiques pour étudier l’expression de l’ARN dans des sections de cerveau de rat

Gene analyse de l'expression d'un sous-ensemble de cellules dans un tissu spécifique représente un défi majeur. Cet article décrit comment isoler l'ARN total de haute qualité à partir d'une population de cellules spécifiques en combinant une méthode de immunomarquage rapide avec microdissection laser.

Isolement de l&#39;ARN à partir de sous-populations cellulaires spécifiques en utilisant le laser capture microdissection Combiné avec Rapid immunomarquage

Ici, on décrit une méthode pour l’isolement des microvaisseaux de cerveau de rat et pour la préparation des échantillons de la membrane. Ce protocole a l’avantage clair de produire des microvaisseaux enrichi échantillons avec la protéine acceptable donnent sur des animaux. Échantillons peuvent être ensuite utilisés pour les analyses de protéines robuste à l’endothélium microvasculaire cérébral.

Une méthode Simple et reproductible pour préparer les échantillons de la Membrane des microvaisseaux de cerveau de Rat fraîchement isolées

Nous fournissons un protocole pour l'isolement des microglies de différentes régions disséquées d'un hémisphère de cerveau de souris adulte, suivi de la préparation semi-automatisée de bibliothèque pour le séquençage profond d'ARN unicellulaire des transcriptomes pleine longueur. Cette méthode aidera à élucider l'hétérogénéité fonctionnelle des microglies dans la santé et la maladie.

Isolement des microglies spécifiques à la région de l'hémisphère cérébral d'une souris adulte pour le séquençage profond de l'ARN à une seule cellule

Cette procédure décrit la collecte de régions cérébrales congelées discrètes pour obtenir des protéines et de l’ARN de haute qualité à l’aide d’outils peu coûteux et couramment disponibles.

Collection de régions de cerveau de rongeur congelés pour des analyses en aval

Nous présentons un protocole pratique, étape par étape, rapide pour l’ablation du cerveau de souris et la dissection de régions discrètes à partir de tissus cérébraux frais. L’obtention de régions cérébrales pour l’analyse moléculaire est devenue une routine dans de nombreux laboratoires de neurosciences. Ces régions du cerveau sont immédiatement congelées pour obtenir des données transcriptomiques de haute qualité pour l’analyse au niveau du système.

Microdissection du cerveau de souris en régions fonctionnellement et anatomiquement différentes

La combinaison de la microdissection par capture laser et de la RT-qPCR microfluidique fournit une spécificité anatomique et biotechnique dans la mesure du transcriptome dans les neurones individuels et la glie. L’application de méthodes créatives avec l’approche biologique d’un système à la maladie psychiatrique peut conduire à des percées dans la compréhension et le traitement telles que l’hypothèse de la neuroinflammation antirécompense dans la dépendance.

Étudier les facteurs d’antirécompense dans le comportement de dépendance avec des méthodes d’expression génique unicellulaire anatomiquement spécifiques

Apprenez la micro-dissection du cerveau de rat pour extraire l'ARN et les protéines de régions spécifiques comme le bulbe olfactif, le cortex frontal, le striatum et l'hippocampe. Cette méthode préserve l'intégrité des échantillons pour la recherche en neurosciences.

Micro-dissection du cerveau de rat pour l'ARN ou de l'extraction de protéines à partir région spécifique du cerveau

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