Manuel de retenue et communes voies d'administration composés chez la souris et le rat

L'objectif général de la vidéo suivante est de familiariser le spectateur avec diverses techniques utilisées pour la contention manuelle et l'administration de composés chez les souris et les rats. Les souris et les rats peuvent être contenus à l'aide de plusieurs techniques à une ou deux mains ou à l'aide de dispositifs de contention en plastique. Les techniques d'administration de composés, telles que l'injection intrapéritonéale, sous-cutanée, intravasculaire et intradermique, sont présentées dans cette vidéo, ainsi que les méthodes d'injection, la gavage oral et l'administration intranasale.

Apprendre à manipuler les animaux avec assurance, douceur et sécurité constitue une partie importante de la recherche in vivo. Les animaux doivent toujours être manipulés de manière à garantir la sécurité tant de l'animal que du chercheur. En général, les personnes novices dans ces méthodes peuvent éprouver des difficultés, car il faut du temps pour se familiariser avec le travail sur les rongeurs.

Les rongeurs peuvent également intimider ou effrayer les personnes qui débutent dans leur manipulation. Une démonstration visuelle des techniques d'administration de la dose et de contention est essentielle à la fois pour une administration réussie du composé et pour éviter tout stress ou blessure à l'animal ainsi qu'au manipulateur. Les souris peuvent être contenues manuellement à l’aide d’une technique à une main ou à deux mains.

La première étape de l'une ou l'autre méthode consiste à soulever délicatement la souris par la base de la queue pour la poser sur la grille métallique du couvercle de la cage, ou une surface rugueuse similaire. Pour la technique à une main, glissez la base de la queue entre le troisième et le quatrième doigt tout en tirant doucement en arrière sur la queue. Cela amènera la souris à s'agripper à la surface et à tirer vers l'avant.

Ensuite, saisissez fermement le souriceau par la nuque avec la même main qui tient la queue. Saisissez avec l'index et le pouce près de la base de la tête et prolongez la prise le long du dos en incluant le majeur et l'annulaire.

Veillez à exercer une pression suffisante sur la peau autour du cou pour empêcher la souris de tourner ou de se tordre, sans toutefois appuyer trop fort afin que l'animal puisse respirer. La technique à deux mains est similaire, sauf que, tandis qu'une main tire doucement la queue vers l'arrière, l'autre saisit rapidement et fermement la souris par la peau du cou, la queue étant tenue dans une main et la peau du cou dans l'autre. Soulevez la souris et glissez la base de la queue entre la paume et le troisième ou le quatrième doigt de la main qui tient la peau du cou.

Comme précédemment, assurez-vous que la prise est ferme, tout en permettant à l'animal de respirer. La prise par la nuque chez le rat s'effectue généralement à deux mains. Tout d'abord, retirez le rat de sa cage et placez-le sur une surface rugueuse.

Ensuite, saisissez le rat par la queue avec la main non dominante et tirez doucement vers l'arrière. Maintenez fermement la queue d'une main et approchez la nuque du rat par l'arrière avec l'autre main. Appliquez une pression douce sur le dos du rat tout en remontant vers les omoplates.

Et enfin, saisissez la peau du cou entre les doigts et la paume de la main. Les rats peuvent émettre des vocalisations lorsqu’ils sont maintenus de cette manière. Lorsque vous utilisez une prise par-dessus l’épaule, saisissez le rat par la queue avec la main dominante et tirez doucement vers l’arrière.

Ensuite, placez la main non dominante sur le dos du rat en vous approchant par l'arrière. Saisissez le rat autour du thorax avec l'annulaire, l'auriculaire et le pouce. La tête du rat doit se trouver entre l'index et le majeur.

Une autre méthode de contention est la prise sous les épaules. Saisissez la queue avec la main dominante comme précédemment indiqué et placez la main non dominante sur le dos du rat en approchant par l'arrière. Ensuite, saisissez le rat autour du thorax juste sous les omoplates.

Les avant-bras du rat doivent être doucement relevés à l'aide du pouce et de l'index. Les avant-bras doivent se croiser sous le menton du rat, l'empêchant ainsi de mordre. Le rat peut être maintenu de cette manière d'une seule main si son corps est stabilisé contre l'opérateur.

Un cône souple en plastique fin, appelé cône de contention, peut également être utilisé pour la contention. Poussez l'animal vers l'avant jusqu'à ce que son museau dépasse par l'ouverture située à l'extrémité du cône de contention, puis maintenez le sac fermé autour de la queue ou utilisez un élastique ou une pince en plastique pour fixer l'animal en place. Une fois l'animal immobilisé, les injections peuvent être administrées à travers le matériau plastique. Un récipient rigide en plastique est utile lorsque l'accès à la queue est nécessaire.

Insérez le rat comme décrit par le fabricant de l'appareil. Avec ce type de dispositif de contention, on tire doucement le rat vers l'arrière dans la cage de contention par la queue. Placez le couvercle à l'avant de l'appareil et ajustez-le pour limiter les mouvements de l'animal.

Si les animaux semblent agités, une contention avec une serviette peut être utilisée en la plaçant sur l'animal ; l'obscurité et la contention douce procurées par la serviette peuvent apaiser un rat nerveux. Placer délicatement la serviette sur le rat, puis saisir soigneusement le corps de l'animal. Envelopper le rat avec la serviette en veillant à ne pas couvrir son nez.

Déplacez la serviette de manière à exposer la partie du corps destinée à l'injection. Avant d'appliquer l'une des techniques d'administration décrites ci-dessous, il est conseillé de s'exercer à manipuler la seringue. Idéalement, une main manipulera la seringue tandis que l'autre maintiendra l'animal. Les aiguilles doivent être insérées dans l'animal avec le biseau vers le haut, en particulier pour les injections intraveineuses.

Les aiguilles de petit calibre s'endommagent facilement lors de leur insertion dans les bouchons de flacon. Utilisez un calibre plus grand pour prélever les produits, puis remplacez-le par un calibre plus petit pour l'injection. L'administration intranasale est utilisée pour certains types d'agents infectieux dans les travaux sur les allergies et l'asthme, ainsi que dans certaines études impliquant les poumons.

L'administration intranasale ne nécessite pas d'anesthésie ni de chirurgie, contrairement à l'installation intratrachéale. Pour l'administration intranasale, immobilisez l'animal comme décrit précédemment et, à l'aide d'une seringue ou d'une pipette, déposez une petite quantité du matériau à inhaler sur les narines de l'animal. Observez la disparition du matériau dans les narines et répétez l'opération si nécessaire.

Les composés sont administrés par voie intramusculaire s'ils nécessitent une absorption rapide et peuvent être injectés en très petits volumes. La contention pour les injections intramusculaires peut nécessiter deux personnes, car une patte arrière doit être libre et stabilisée pour l'injection. Insérez l'aiguille perpendiculairement à la peau au-dessus du muscle quadriceps ou du faisceau musculaire latéral de la cuisse de l'animal.

Veillez à ne pas injecter dans la masse musculaire postérieure, car il est possible de lésionner le nerf sciatique. L'administration intrapéritonéale est choisie lorsqu'un grand volume de composé doit être administré, et lorsque le taux d'absorption est acceptable pour approcher celui de l'administration orale.

Pour effectuer une injection intrapéritonéale, immobilisez l'animal et orientez la pointe de son museau vers le sol. Pour exposer l'abdomen, repérez la ligne médiane de l'animal et divisez mentalement l'abdomen en quadrants.

Choisissez un site d'injection dans les quadrants inférieurs, en particulier dans le quadrant inférieur droit de l'animal. Utilisez une seringue et une aiguille de taille appropriée pour injecter la substance dans l'animal. L'administration sous-cutanée d'une substance est utilisée lorsque l'on souhaite une absorption lente.

Les souris et les rats possèdent une grande quantité de peau lâche, ce qui permet d'administrer des volumes relativement plus importants par voie sous-cutanée par rapport aux humains. Pour les injections sous-cutanées, maintenez l'animal de manière lâche comme illustré précédemment. Saisissez la peau et tirez-la doucement vers le haut.

En formant une tente à l’aide d’une seringue et d’une aiguille de taille appropriée, insérez l’aiguille sous la peau tendue selon un angle compris entre 30 et 45 degrés, puis injectez le produit. Un léger gonflement sous la peau indique une injection réussie. Si les animaux doivent être manipulés régulièrement après une injection sous-cutanée, n’utilisez pas la nuque.

Utilisez plutôt la peau du dos du garrot. Si des animaux doivent recevoir plusieurs injections sous-cutanées, alternez les sites d'injection. La contention des animaux pendant l'administration intradermique peut s'avérer difficile et nécessiter l'utilisation d'une sédation chimique. Si un anesthésique est utilisé, assurez-vous qu'il n'interfère pas avec les objectifs de la recherche.

Lors de l'administration d'une injection intradermique, commencez par raser les poils au niveau du site d'injection afin que la peau soit clairement visible à l'endroit de l'injection. Insérez une aiguille de taille appropriée sous la peau selon un angle de 15 à 30 degrés. N'insérez pas l'aiguille trop profondément.

Si l'insertion est correcte, l'injection doit rencontrer une résistance. Une petite bulle, de couleur plus pâle que la peau environnante, sera visible si l'injection a réussi. Appliquez une pression douce pour éviter le reflux du produit.

L'administration intravasculaire est utilisée pour une grande variété de composés et constitue la voie d'administration idéale lorsque le composé peut être formulé correctement et qu'un effet très rapide est souhaité. Pour une injection intravasculaire dans la veine caudale latérale, immobilisez l'animal dans un cône de découpage ou un dispositif d'immobilisation en plastique pour rongeur. Comme cela a été démontré précédemment, tenez la queue de l'animal par l'extrémité avec la main non dominante afin de la redresser et de la faire pivoter. Effectuez un quart de tour pour positionner les veines de la queue en position dorsale.

Identifier l'une des deux veines latérales de la queue pour l'injection, en évitant l'artère ventrale de la queue. Approcher la portion distale de la queue avec l'aiguille selon un angle de 15 à 20 degrés et injecter le produit. Une injection réussie se traduira par une pénétration du produit dans la veine sans résistance et un blanchissement de la veine de la queue pendant toute la durée de l'injection.

Placer l'injection plus en distal permet de préserver une portion intacte de la veine qui peut être utilisée si la première tentative échoue. L'administration intragastrique ou par gavage oral n'est effectuée que sur des animaux maintenus éveillés, car l'anesthésie ou la sédation augmente le risque d'aspiration. Les composés dont la sécurité est testée pour une administration orale chez l'humain sont souvent administrés de cette manière. Commencez par sélectionner une sonde d'alimentation orale de taille appropriée.

La longueur est déterminée en tenant l'animal immobilisé en position verticale et en mesurant à partir de l'angle de la bouche. L'extrémité arrondie de l'aiguille d'alimentation doit atteindre la dernière côte de l'animal. Immobilisez l'animal de manière que sa tête et son corps forment une ligne droite et verticale.

Cela redresse l'œsophage, permettant un passage plus facile de l'aiguille d'alimentation. Insérez l'extrémité arrondie de l'aiguille dans la bouche de l'animal, par-dessus la langue. Une fois l'aiguille en place, remontez-la avec la seringue en exerçant une pression douce contre le palais, de sorte que le nez de l'animal soit dirigé vers le plafond.

Il peut être nécessaire de rediriger légèrement l'aiguille lorsqu'elle passe à l'arrière de la gorge. Toute tension exercée sur l'aiguille indique qu'il faut ajuster la position ; poursuivre l'introduction de l'aiguille jusqu'à ce que la distance prédéterminée soit atteinte. L'aiguille doit progresser facilement et l'animal ne doit pas haleter ni s'étrangler lors de l'administration de la substance.

En cas de résistance ou si l'animal halète, s'étouffe ou devient bleu, arrêtez immédiatement et retirez l'aiguille. Une fois maîtrisées, ces techniques vous permettront d'administrer en toute sécurité des doses à des rats et des souris, tout en les immobilisant efficacement. Lors de la réalisation de ces procédures, il est important de se rappeler qu'un animal correctement immobilisé rend la procédure sûre tant pour l'animal que pour l'opérateur.

N'oubliez pas que travailler avec des animaux en science est un privilège et une responsabilité. Le choix de la méthode de contention appropriée ainsi que des voies d'administration adéquates constitue à la fois une bonne pratique scientifique et un bon bien-être animal.