Caecale procédure Crevaison ligature

Bonjour, je m’appelle Miguel Toscano du laboratoire du Dr Dena au département de microbiologie et d’hémologie de l’Université Temple. Aujourd’hui, nous allons vous montrer comment configurer le modèle d’allégation et de ponction iCal dans la souche de souris C 57 Black Seas. Nous utilisons ce modèle dans notre laboratoire pour imiter la septicémie humaine.

Fondamentalement, ce modèle consiste en une ponction du sérum qui permet la libération de matières fécales dans la cavité péritonéale pour produire une septicémie polymicrobienne, générant ainsi une réponse immunitaire exacerbée. Dans ce modèle, de nombreux organes et différents types de cellules sont endommagés de manière irréversible. Cela peut finalement causer la mort de l’animal.

Alors commençons. Anesthésie de la souris. La première étape consiste à anesthésier l’animal par injection intrapéritonéale.

Un mélange, un à un, de cétomine et de xylazine. Pour éviter d’être mordu par la souris, pour éviter de lui faire mal, il faut attraper la souris par la queue d’une main. De l’autre main, nous appuyons contre le sol.

Ensuite, nous pouvons saisir la souris à l’arrière de la tête, puis retourner l’animal sur le dos pour exposer l’abdomen. Avec une seringue à insuline de calibre 29, nous injectons 20 à 30 microlitres de l’anesthésie dans la cavité péritonéale. Préparation de la souris pour la procédure, saisissez le dos de la souris et rasez son abdomen en appuyant sur la queue et/ou la patte de la souris.

Nous vérifions que la souris n’est pas sensible à la douleur, puis l’abdomen est désinfecté. D’abord en frottant avec une solution de bétadine, puis en essuyant avec une lingette à l’alcool isopropylique pendant au moins une minute. Pour pratiquer une laparotomie, on soulève la peau au milieu de l’abdomen à l’aide de la pince et en faisant une petite incision d’environ un centimètre de longueur.

Ensuite, soulevez le périnée et pratiquez une autre petite incision pour exposer la cavité péritonéale. À l’aide d’une pince incurvée, tenez la membrane péritonéale. Identifiez et exposez le cæcum en le faisant passer à travers la membrane péritonéale.

Placez-le sur l’abdomen. C’est maintenant le moment de la ligature. Il s’agit d’un facteur important.

Afin de déterminer la sévérité du modèle, nous pouvons moduler la sévérité de la procédure. Par l’extension de la ligature, les souris développeront une septicémie plus légère. Si la ligature est faite plus près de l’extrémité du cæcum, une septicémie de grade moyen si elle est pratiquée au milieu et une septicémie sévère si elle est pratiquée plus près de la valve iléo-caecale, la gravité de la procédure sera reflétée par le pourcentage de mortalité.

Ne jamais ligaturer la valve iléo-caecale. Maintenant, faites la ligature à l’aide d’une suture en soie avec un double nœud pour la rendre serrée, en faisant la ponction Tenez le caecum et faites soigneusement une ponction près du site de ligature et faites une autre ponction plus près de la fin du caecum . La membrane du secum est souple et elle se perfore très facilement.

En utilisant des aiguilles d’épaisseurs différentes et en faisant une ou deux perforations, nous pouvons également moduler la sévérité du modèle. La méthode de ponction simple ou double présentée ici est une technique alternative à la ponction classique de bout en bout. L’avantage d’utiliser la méthode de ponction simple ou double est que l’on peut mieux contrôler la quantité d’excréments extrudés lorsqu’ils cherchent à les presser.

Tenez le secum avec les deux doigts et extrudez doucement le caïcum pour extraire une très petite quantité de matières fécales. Fermeture de la laparotomie, puis soulevez le péritoine et remettez soigneusement le caecum en place. Dans la cavité péritonéale.

Soyez extrêmement prudent pour éviter les piqûres accidentelles du caecum Avec la pince, l’utilisation de pinces plus grosses est recommandée. C’est le moment de fermer la cavité péritonéale. En utilisant une suture en soie, il est très important que vous vous assuriez qu’elle est très bien fermée.

On part d’un côté de la plaie où on fait un nœud. Continuez à faire la suture jusqu’à l’autre côté en passant la soie sous la boucle de la piqûre précédente. Pour fermer la peau, nous pouvons utiliser des clips de plaie Mitchell ou des clips reflex en utilisant le bon outil pour fermer les clips.

Placez autant de clips que nécessaire pour vous assurer que la plaie est fermée. Réanimez les souris en injectant par voie sous-cutanée un millilitre de solution saline préchaude. À l’aide d’une aiguille de calibre 25, cette mesure de réanimation liquidienne induira la phase hyperdynamique de la septicémie, mettant fin à la procédure.

Placez la souris sous une lumière chauffante infrarouge, ou alternativement sur un coussin chauffant jusqu’à ce que la souris se remette de l’anesthésie. Fournissez de la nourriture et de l’eau sur le sol de la cage et surveillez les animaux toutes les huit à 12 heures pour détecter tout signe de maladie. Injecter la buprénorphine par voie sous-cutanée pour l’analgésie postopératoire.

Un autre analgésique à utiliser est le T.Tramadol. Les signes de septicémie, les symptômes de la septicémie sont la fièvre, la léthargie, la pelo, l’érection, la diarrhée, le regroupement et le malaise. Les animaux très malades présentent une baisse sévère de la température corporelle et ils bougent à peine pour éviter de souffrir.

Ils doivent être euthanasiés à ce stade H.So c’est ainsi que nous effectuons la ligature de la faucille et le modèle ponctuel. J’espère que vous avez apprécié la démonstration de cette procédure et que vous l’avez trouvée très utile pour vos recherches avant de commencer votre étude sur les animaux. Nous vous recommandons fortement d’utiliser des esprits anciens ou inutilisés pour l’entraînement afin d’établir le degré de sévérité approprié pour vos expériences en modifiant la longueur de la ligature, l’épaisseur de l’aiguille et le nombre de ponctions.

Cela dit, au revoir.