Préparation d’organoïdes à partir de tumeurs : un modèle tumoral 3D in vitro
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0 vues • 3:17 min • April 30th, 2023
Hachez le tissu tumoral en petits morceaux. Transférez les morceaux dans un tube avec tampon de digestion. Les fibres de collagène entourant les cellules se décomposent, dégradant la matrice des tissus. Ensuite, granulez les morceaux digérés et jetez la majeure partie du tampon de digestion. Agitez le tube pour briser la pastille.
La solution se compose maintenant d’amas de cellules de différentes tailles. Remettre en suspension les amas cellulaires dans une solution de trypsine et d’un inhibiteur de ROCK. La trypsine continue de décomposer la tumeur et l’inhibiteur empêche la mort cellulaire. À intervalles réguliers, pipetez la solution pour briser les amas et disperser les cellules. Ensuite, remettez les cellules en suspension dans une solution matricielle à la concentration appropriée.
Placez des gouttes de la solution dans une plaque de culture pour former des dômes matriciels. Placez les plaques à l’envers dans un incubateur et laissez la matrice se solidifier complètement. Ensuite, ajoutez le milieu de culture cellulaire et incubez, à l’endroit. La matrice fournit un échafaudage pour soutenir la croissance tridimensionnelle de l’organoïde.
Après le hachage, placez les morceau
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