Isolement d’une colonie de cellules cancéreuses métastatiques à partir d’une MCA de poulet : une procédure pour isoler les cellules cancéreuses à partir de cultures d’œufs sans coquille

La membrane chorioallantoïdienne du poulet, ou CAM, est une membrane à trois couches située juste sous la coquille de l’œuf. Il se compose d’un ectoderme externe, d’un mésoderme hautement vasculaire et de l’endoderme le plus interne.

Le mésoderme CAM comprend des vaisseaux sanguins, des fibroblastes et des composants stromaux, et fournit ainsi un environnement favorable à la colonisation des cellules tumorales.

Pour isoler les cellules cancéreuses colonisées de la MCA, commencez par prélever une culture d’ovules sans coquille pré-injectée avec des cellules cancéreuses marquées par fluorescence dans une boîte. Visualisez l’ovulation au microscope à fluorescence. Localisez les colonies de cancer métastatiques fluorescentes et compactes.

Excise doucement le tissu CAM contenant les colonies métastatiques d’intérêt. Transférez le tissu CAM excisé dans un tube de microcentrifugation. Coupez le tissu en petits morceaux pour rendre le CAM accessible au traitement enzymatique dans les étapes suivantes.

Complétez le tube avec l’enzyme collagénase et incubez. La collagénase dégrade la protéine de collagène dans le mésoderme CAM et initie la dissociation des colonies cancéreuses. Centrifuger l