Récolte de la membrane chorioallantoïde du poulet : une méthode pour isoler la membrane chorioallantoïde porteuse d’une tumeur à partir d’un œuf de poule

La membrane chorioallantoïdienne ou CAM est une membrane extraembryonnaire, adhérant étroitement à la membrane interne de la coquille d’un œuf intact. La CAM est un système idéal pour l’implantation et la modélisation des tumeurs car il s’agit d’une membrane naturellement immunodéficiente et hautement vascularisée.

Pour récolter un CAM porteur d’une tumeur, prenez d’abord un œuf de poule fécondé viable ayant un CAM entièrement développé préalablement transplanté avec une tumeur. Ajouter du paraformaldéhyde au CAM. Le paraformaldéhyde réticule les protéines membranaires, ce qui rend la membrane plus rigide pour faciliter sa récolte.

Ensuite, coupez autour de l’œuf pour séparer la partie supérieure de la coquille de l’œuf du reste de l’œuf, avec le CAM porteur de la tumeur toujours attaché à la coquille retirée. Tenez et soulevez le CAM par un bord pour le détacher en douceur de la coquille de l’œuf.

Ensuite, placez le CAM récolté dans du paraformaldéhyde avec le greffon tumoral vers le haut. Le paraformaldéhyde préserve la morphologie de la CAM et de la greffe tumorale, préparant ainsi la membrane prélevée pour diverses analyses en aval.

À la fin de l’incubation, placez les œufs sur la paillasse du laboratoire. À l’aide d’une seringue, perforez le pansement pelliculaire de chaque œuf et appliquez environ 300 microlitres de paraformaldéhyde à 4 % sur chaque membrane chorioallantoïdienne pour rigidifier légèrement le tissu afin de faciliter le processus de récolte.

À l’aide de ciseaux, retirez la moitié supérieure de la coquille de l’œuf avec la membrane chorioallantoïdienne attachée. Réduire la taille de la coquille à environ 3 centimètres de diamètre, en conservant la partie de la membrane chorioallantoïde où les cellules ganglionnaires et tumorales de la racine dorsale ont été greffées au centre du fragment de coquille. Ensuite, saisissez la membrane chorioallantoïdienne à l’aide d’une pince fine et détachez le tissu de la coquille de l’œuf pour le transférer dans un puits d’une plaque à 6 puits contenant 2 millilitres de paraformaldéhyde à 4 % par puits.

• Chorioallantoic Membrane (CAM) – An extraembryonic fluid-filled bag in fertile eggs.
• Chicken Tumor - The abnormal cell proliferation found in chickens.
• Paraformaldehyde - A reagent used to preserve biological tissue.
• Harvest Protocol - The procedure to extract desired elements, like tumor-bearing CAM.
• Extraembryonic Membrane - A tissue in eggs that permits waste disposal and gas exchange.

• Introduce Chorioallantoic Membrane – A highly vascular, immunodeficient membrane in chicken eggs (e.g., CAM).
• Key Concepts - The used of CAM as a model for tumor implantation because of its properties (e.g., environment).
• Underlying Mechanisms - A specific protocol followed for the harvesting of a tumor-bearing CAM (e.g., procedure).
• Connect to Experiment – The preservation of CAM and tumor morphology using paraformaldehyde for future analysis(e.g., application).

• [Question 1] What is a chorioallantoic membrane and how is it used in tumor implantation modeling?
• [Question 2] How do you harvest a tumor-bearing chorioallantoic membrane?
• [Question 3] What is the role of paraformaldehyde in preserving the CAM for future analysis?

• Practical Applications - CAM model provides a platform for pregnancy studies and cancer research (e.g., reproduction).
• Industry Impact - Advances chicken farming, food industry, and biomedical research (e.g., agriculture).
• Societal Importance - Contributes to understanding cancer propagation and supports drug testing (e.g., healthcare).
• Link to Scientific Advancements – Facilitates understanding embryo development and disease pathogenesis (e.g., embryology).