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0 vues • 2:31 min • April 30th, 2023
Les mousses dérivées de l’ECM sont des échafaudages très poreux obtenus à l’aide de la matrice extracellulaire - un composant non cellulaire du microenvironnement tissulaire.
Pour fabriquer une mousse dérivée de l’ECM, commencez par prendre une suspension homogène de poudre ECM ultrafine dans un tube. Incuber la suspension à une température chaude avec une agitation constante pour éviter l’agglutination de l’ECM.
Ensuite, à l’aide d’une seringue, transférez la suspension ECM liquéfiée dans le moule souhaité. Réfrigérez le moule pendant la nuit pour que l’ECM se solidifie. L’ECM se solidifie pour former une structure de réseau tridimensionnelle.
Enfin, placez le moule solide contenant l’ECM dans une fiole de lyophilisateur. Connectez la fiole à un système de lyophilisation. À l’intérieur du lyophiliseur, l’échantillon est soumis à une température ultra-froide et à une basse pression. Cela se traduit par la formation de cristaux de glace dans les espaces interstitiels du réseau ECM.
En temps voulu, la pression et la température du lyophilisateur augmentent progressivement. Ces conditions facilitent la sublimation - un processus dans lequel le solide se convertit directement à sa forme gazeuse plutôt que de subir une fusion.
Les vapeurs gazeuses s’évaporent, laissant derrière elles des espaces vides à l’intérieur du réseau ECM, générant ainsi un échafaudage poreux dérivé de l’ECM.
Incuber la suspension ECM à 37 degrés Celsius avec une agitation continue à 120 tr/min jusqu’à ce que la suspension soit chaude. Ensuite, utilisez 0,2 molaire d’acide acétique pour diluer la suspension d’échantillon à la concentration souhaitée. Avec la seringue de 3 millilitres et une aiguille de 18G, remplissez le moule souhaité avec la suspension ECM.
Les mousses peuvent être fabriquées dans une gamme de géométries en fonction de la forme du moule. Couvrir et congeler les moules à moins 20 ou moins 80 degrés Celsius. Ensuite, placez les moules dans une fiole de lyophilisateur. Connectez le flacon au système de lyophilisation du laboratoire et séchez les moules pendant 24 heures ou jusqu’à ce qu’ils soient complètement secs.