Essai de discrimination de la population du côté cancéreux : une méthode pour isoler des cellules souches cancéreuses à l’aide d’un test d’efflux de colorant de Hoechst

Une tumeur contient une petite fraction de cellules souches connues sous le nom de population latérale. Ces cellules sont chimiorésistantes, ce qui les rend responsables de la rechute du cancer.

Pour isoler la population latérale de cellules cancéreuses, commencez par ajouter Hoechst - une solution de colorant fluorescent - à la fiole contenant la suspension de cellules cancéreuses. À l’intérieur des cellules cancéreuses normales, les molécules de Hoechst pénètrent dans le noyau et se lient à la région riche en A-T de l’ADN, ce qui entraîne une forte fluorescence dans ces cellules.

En revanche, la population latérale contient une forte concentration de transporteurs ABC - des pompes d’efflux qui éliminent rapidement les molécules de colorant de la cellule. Cet efflux actif de molécules de colorant rend la population latérale fluorescente à faible intensité.

Maintenant, prenez une autre fiole de cellules cancéreuses traitées à Hoechst et ajoutez-y du vérapamil. Cette fiole agit comme un contrôle car Verapamil bloque les transporteurs ABC. Cette étape entraîne une réduction de l’efflux de Hoechst et conserve le colorant à l’intérieur des cellules de population latérales.

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