Extraction de la moelle épinière : un protocole pour isoler la moelle épinière murine pour les études in vitro

0 vues3:08 min • April 30th, 2023

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Pour l’extraction de la moelle épinière, commencez avec une souris euthanasiée en position couchée. Vaporisez de l’éthanol pour éviter toute contamination potentielle par la fourrure.

Coupez la ligne médiane de la tête à la queue et ouvrez la peau pour révéler le tissu sous-jacent. Examinez le crâne de la souris pour localiser la jonction craniocervicale qui relie le crâne à la colonne cervicale.

Ensuite, incisez la jonction craniocervicale perpendiculairement pour couper la connexion entre la tête et le cou. Disséquez la colonne vertébrale jusqu’à la cinquième vertèbre lombaire. Par la suite, coupez la colonne vertébrale au niveau de la cinquième vertèbre lombaire pour couper la connexion des niveaux vertébraux inférieurs.

Maintenant, tournez la souris en position couchée. Fendre le péritoine et la paroi thoracique pour exposer à la fois la cavité abdominale et thoracique. Retirer les organes péritonéaux et rétropéritonéaux pour accéder à la colonne vertébrale.

Coupez les côtes pour séparer la colonne vertébrale du reste du corps. Enfin, rincez la moelle épinière isolée avec une solution saline froide pour éliminer tous les contaminants sanguins.

Après avoir euthanasié l’animal dans une chambre à CO2, trempez la fourrure avec de l’éthanol à 70 % et laissez-la sécher. Épinglez la souris en position couchée, puis faites une incision médiane s’étendant cranio-caudale de l’arrière du cou à la colonne lombaire.

Ensuite, utilisez une pince pour soulever les lambeaux dermiques de manière bilatérale et exposer le tissu sous-cutané. Palper le crâne de la souris jusqu’à ce que la jonction craniocervicale soit identifiée. Utilisez des ciseaux inclinés perpendiculairement à l’animal pour couper les muscles cervicaux et la colonne vertébrale à la jonction craniocervicale. Ensuite, disséquez la colonne vertébrale par voie caudale et utilisez des ciseaux pour effectuer une transsection caudale complète au niveau de la cinquième vertèbre lombaire.

Ensuite, positionnez la souris en position couchée et, après avoir fait une incision le long de la ligne médiane du cou à l’abdomen, rétractez la peau latéralement, puis ouvrez le péritoine.

Cranialement, ouvrez la paroi thoracique avec des ciseaux. Après avoir enlevé les organes péritonéaux et rétropéritonéaux, utilisez une pince et une lame chirurgicale pour couper les côtes, laissant environ 5 millimètres de côtes saillantes de la colonne vertébrale. Retirez la colonne vertébrale du reste du corps et lavez-la deux fois avec du PBS froid.

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Dernière mise à jour : 15 août 2026