Dosage du méthyl thiazolyl tétrazolium ou MTT : un dosage colorimétrique pour mesurer la résistance aux médicaments par la détermination de l’activité métabolique dans les cellules cancéreuses

Le dosage du méthylthiazole tétrazolium ou MTT permet d’évaluer la viabilité cellulaire sur la base de la mesure de l’activité métabolique cellulaire.

Pour commencer l’essai, préparez une gamme de concentrations croissantes du médicament d’intérêt. Ajoutez des volumes égaux des différentes concentrations de médicament dans les puits d’une plaque multipuits.

Ensuite, pipetez une suspension de cellules cancéreuses parentales sensibles aux médicaments souhaitées et de leurs variantes résistantes aux médicaments dans un milieu approprié, chacun dans un ensemble de puits contenant différentes concentrations de médicament. Incuber l’assiette.

En culture, les cellules cancéreuses sensibles aux médicaments sont sensibles aux molécules médicamenteuses, ce qui entraîne la mort cellulaire même à de faibles concentrations. Au contraire, les cellules cancéreuses résistantes aux médicaments sont insensibles aux molécules médicamenteuses, ce qui facilite leur survie et leur prolifération, même à des concentrations de médicaments plus élevées.

Traitez les cellules avec la solution MTT et incuberez. Le MTT, un sel de tétrazolium chargé positivement, pénètre facilement dans les cellules métaboliquem