Dérivation de podocytes rénaux humains à partir de cellules souches pluripotentes induites : une procédure de différenciation dirigée de podocytes rénaux matures à partir de cellules souches

Les cellules matures peuvent être reprogrammées pour retrouver leur état indifférencié et prolifératif semblable à celui des cellules souches. Ces cellules reprogrammées sont appelées cellules souches pluripotentes induites ou IPSC. Pour différencier les cellules pluripotentes en cellules spécialisées dans les podocytes impliquées dans la filtration des déchets rénaux, il faut commencer par prendre une suspension d’IPSC humaines dans un milieu d’induction du mésoderme.

Transférez cette suspension sur une plaque de culture recouverte d’une matrice de base et incuberez. La matrice de socle facilite l’adhérence des IPSC à la base. Par la suite, les facteurs spécifiques présents dans le milieu induisent la différenciation des IPSC en cellules du mésoderme, cellules précurseurs des podocytes. Aspirez le support usé.

Complétez la plaque avec le volume souhaité d’un milieu d’induction intermédiaire du mésoderme et incubez pendant une durée prolongée. Cette étape conduit à la différenciation des cellules mésodermiques en podocytes immatures. Remplacer le milieu d’induction intermédiaire du mésoderme par une solution de trypsine pour dissocier les cellules adhérentes de la plaque.

Ensuite,