Administration de plasmides d’ADN dans l’urothélium de la vessie de souris : une procédure basée sur l’électroporation pour administrer efficacement des plasmides d’ADN dans les cellules urothéliales de la vessie murine afin de générer des modèles génétiquement modifiés

Pour commencer, préparez une souris femelle anesthésiée en position couchée. Assurez-vous que sa vessie est complètement vide. Par l’ouverture urétrale, insérez un cathéter lubrifié. La lubrification facilite le passage de l’urètre pour l’entrée dans la vessie.

Après le cathétérisme, faites une incision abdominale et disséquez la musculature interne pour exposer la vessie. Ensuite, pipetez une suspension de plasmides d’ADN mélangés à un colorant approprié dans l’extrémité externe du cathéter. Ces plasmides d’ADN codent pour un gène rapporteur fluorescent.

Fixez une seringe au cathéter et poussez-la pour administrer la solution plasmidique dans la vessie. Les molécules de colorant injectées colorent la vessie, confirmant ainsi l’administration réussie de la solution plasmidique. Retirez le cathéter et resserrez l’orifice urétral externe pour empêcher l’écoulement de la solution plasmidique.

Maintenant, pincez la vessie à l’aide de deux électrodes reliées à un générateur d’électroporation. Appliquez des impulsions électriques de tension appropriée pendant une période souhaitée sur la vessie. L’exposition de l’urothélium de la vessie, la muqueuse la plus interne de la vessie, aux cham