Modèle de cellules souches de gliome marquées à la luciférase : une méthode médiée par lentivirus pour préparer des cellules souches de gliome marquées à la luciférase pour des études thérapeutiques in vitro

Les cellules souches de gliome ou GSC sont une sous-population de gliome - un cancer des cellules gliales dans le cerveau.

Le marquage de ces GSC avec des enzymes bioluminescentes comme la luciférase permet d’établir des tests d’imagerie à haut débit pour le dépistage de drogues.

Pour préparer des CSG marquées à la luciférase, commencez par une culture de CSG dans un milieu de croissance approprié.

Centrifuger la culture pour obtenir une pastille cellulaire et retirer le surnageant.

Ajoutez des enzymes digestives appropriées à la pastille. Ces enzymes dissocient les amas de cellules et dégradent toute trace de tissu conjonctif pour obtenir une suspension unicellulaire.

Maintenant, centrifugez la suspension unicellulaire et retirez le surnageant. Remettez le granulé en suspension dans un milieu frais.

Ensuite, ensemencez la concentration souhaitée de cellules dans une plaque de culture.

Incuber la culture et laisser les cellules adhérer à la plaque de culture.

Par la suite, ajoutez le titre souhaité d’une construction de gène contenant un virus pour la protéine fluorescente verte améliorée par la luciférase ou EGFP et incubez.

Le virus interagit avec les récepteurs de surface des CS