Dosage basé sur la bioluminescence cellulaire : une méthode à haut débit pour le criblage combinatoire de médicaments
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0 vues • 3:17 min • April 30th, 2023
La bioluminescence cellulaire est une approche très sensible et rapide pour le dépistage à grande échelle des médicaments anticancéreux.
Cette technique utilise des cellules tumorales exprimant la luciférase - une enzyme qui catalyse une réaction chimique productrice de lumière, faisant briller les cellules hôtes dans l’obscurité. L’intensité de la luminescence émise est directement proportionnelle à la densité de la cellule vivante.
Pour commencer, ensemencez des cellules exprimant la luciférase dans une plaque de culture optiquement claire recouverte d’une matrice extracellulaire ou ECM et incubez.
Pendant l’incubation, l’ECM favorise la fixation des cellules au puits de culture.
Ensuite, prélevez des stocks concentrés de la combinaison de médicaments et ajoutez différents volumes de milieux de culture pour préparer la dilution en série du mélange de médicaments.
Maintenant, retirez le milieu de culture des cellules collées. Ajoutez différentes dilutions de la combinaison de médicaments et incuberez.
Pendant l’incubation, la combinaison médicamenteuse agit en synergie sur les cibles cellulaires.
Maintenant, retirez le milieu contenant le médicament et ajoutez un milieu frais cont
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