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Recherche sur le cancer
0 vues • 6:23 min • April 30th, 2023
Les microglies sont des macrophages cérébraux qui aident à éliminer les agents pathogènes, les débris cellulaires et les cellules nerveuses cancéreuses ou le neuroblastome par un processus appelé phagocytose.
Pour imiter la phagocytose in vitro, commencez par une culture de cellules de neuroblastome fixées dans du paraformaldéhyde.
Le paraformaldéhyde, un fixateur chimique, provoque une distribution aléatoire des phospholipides membranaires comme la phosphatidylsérine, ce qui entraîne leur translocation vers la surface externe de la membrane cellulaire tout en stabilisant simultanément la structure cellulaire.
Maintenant, ajoutez un colorant fluorescent réactif aux amines sensible au pH à la culture cellulaire du neuroblastome et incuber.
Les molécules de colorant se lient aux groupes amines de la phosphatidylsérine à la surface des cellules du neuroblastome.
Centrifugez le tube et retirez le surnageant contenant les molécules de colorant non liées. Rincez la pastille cellulaire avec un tampon approprié et centrifugez-la.
Retirez le surnageant et remettez la pastille en suspension dans le milieu de culture.
Ensuite, épépinez des macrophages pré-colorés dans une plaque de culture. L
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