Cryoconservation du cerveau murin par congélation instantanée : une technique pour congeler rapidement un échantillon entier de cerveau de souris pour une analyse histologique

Pour cryoconserver un échantillon de cerveau murin par congélation instantanée, commencez par prendre un bécher rempli d’une solution d’isopentane - un liquide hautement conducteur - et plongez-le dans un bocal contenant de l’azote liquide.

Congelez l’isopentane jusqu’à ce que la solution devienne visqueuse.

Pendant ce temps, prélevez un échantillon entier de cerveau de souris préfixé dans une solution de saccharose. Ce traitement empêche la déformation du tissu cérébral dans les étapes suivantes.

Retirez l’échantillon de cerveau de la solution de saccharose et épongez-le pour éliminer toute trace de saccharose.

Ensuite, positionnez le cerveau dans l’orientation souhaitée dans un cryomoule profond contenant une couche de milieu d’enrobage.

Superposez le cerveau dans le cryomoule avec plus de support d’enrobage pour vous assurer que tout l’organe est couvert.

Ensuite, immergez le cryomoule contenant le cerveau intégré dans le bain d’isopentane pré-refroidi. Le refroidissement rapide du tissu cérébral à une température ultra-basse assure la conservation de l’architecture cérébrale sans aucune distorsion.

Maintenant, laissez l’échantillon de cerveau geler jusqu’à ce que le milieu d’en