Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 3:05 min • April 30th, 2023
En réponse à certains attractifs chimiques libérés par les tumeurs solides, les cellules immunitaires telles que les macrophages associés aux tumeurs ou les TAM s’infiltrent dans les tumeurs solides. Par la suite, ces TAM facilitent la progression tumorale.
Pour étudier les interactions entre les TAM et les cellules tumorales in vitro, il faut commencer par prendre une plaque multipuits avec un insert membraneux. Cette disposition sépare temporairement le puits en deux compartiments.
Ensuite, ajoutez une suspension de TAMs dans le compartiment supérieur du transwell.
Complétez le compartiment inférieur du transwell avec un milieu conditionné enrichi en attractifs chimiques sécrétés par les cellules tumorales.
Incuber l’assiette pendant le temps souhaité.
Pendant l’incubation, les modulateurs chimiques attirent les TAMs. Cela conduit au mouvement des TAM dans le compartiment inférieur via la membrane d’insertion poreuse par chimiotaxie induite par des produits chimiques.
Maintenant, retirez l’insert du puits. Transférez le milieu conditionné contenant la population migratrice de TAM dans une plaque appropriée pour la mesure fluorescente.
Traitez les cellules avec un tampon de lyse c
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