Essai de provocation tumorale répétitive : un essai de culture in vitro pour évaluer le potentiel de destruction des tumeurs répétitives des lymphocytes T du récepteur antigénique chimérique (CAR)

L’immunothérapie anticancéreuse utilise des lymphocytes T à récepteur antigénique chimérique ou cellules CAR-T, des cellules T génétiquement modifiées exprimant des cellules CAR-T spécifiques, qui se fixent aux cellules tumorales provoquant la mort cellulaire. Pour évaluer in vitro le potentiel de destruction tumorale des cellules CAR-T, commencez par une culture de sphéroïdes de tumeur cérébrale. Traiter la culture avec une solution enzymatique appropriée pour obtenir une suspension unicellulaire. Centrifugez et mettez en suspension la pastille cellulaire dans un média approprié.

Pipetez le volume souhaité de cellules tumorales suivies de cellules CAR-T dans une plaque multi-puits. En culture, des récepteurs spécifiques sur les cellules CAR-T reconnaissent et se lient à des antigènes spécifiques sur les cellules tumorales. Cette liaison active les cellules CAR-T et libère des cytokines, entraînant la mort des cellules tumorales. L’activation entraîne également une augmentation de la prolifération des cellules CAR-T.

Remplacez le milieu par un volume égal de cellules tumorales. Répétez l’ajout de cellules un jour sur deux. Après une exposition répétée à l’antigène, peu de cellules