Analyse automatisée de la distribution de la taille des fragments d’ADN de cf basée sur l’électrophorèse capillaire : une méthode basée sur une micropuce d’ADN pour étudier la distribution de la taille de fragments d’ADN isolés à partir de biofluides

Une cellule mourante libère des fragments d’ADNf à l’extérieur de la cellule. Pour analyser la distribution de la taille des fragments d’ADNcf, commencez par une puce à ADN multipuits - un système électrophorétique capillaire miniature. Chaque puits de la puce contient de nombreux canaux de séparation microfluidique à sa base.

Chargez la matrice de gel polysaccharidique et le mélange de colorant de fluorescence dans le puits désigné sur la puce. Positionnez la puce sur l’ensemble d’amorçage équipé d’une seringue vide. Fermez l’ensemble d’amorçage et appuyez sur le piston pour créer une pression vers le bas. Cela facilite l’entrée du gel visqueux du puits dans le canal de séparation respectif.

Ouvrez l’ensemble et remplissez les puits restants avec une suspension d’ADNcf et une échelle d’ADN de la gamme de taille connue. Montez la puce sur l’analyseur de fragments. La forte tension entraîne l’entrée de la suspension d’ADNcf des puits d’échantillon dans le canal de séparation préchargé avec une matrice de gel, où l’ADN est coloré avec le colorant.

Lorsque l’ADN se déplace de la cathode vers l’anode, les petits fragments d’ADN migrent plus rapidement à travers le gel tandis que les pl