Préparation d’un échafaudage ensemencé par CSM : une technique pour préparer un échafaudage ensemencé de cellules souches mésenchymateuses en vue d’une implantation chirurgicale dans un modèle murin

Les cellules cancéreuses produisent des facteurs chimiotactiques pour attirer les cellules souches mésenchymateuses ou CSM des vaisseaux sanguins vers l’emplacement de la tumeur.

Pour étudier l’effet de ces cellules sur la croissance tumorale in vitro, commencez par prendre un substrat d’échafaudage stérilisé. Transférez-le sur une plaque contenant le fluide souhaité pour pré-mouiller l’échafaudage. Placez-le sur une surface sèche pour enlever l’excès de média collé à l’échafaudage pour une meilleure adhérence des cellules. Transférez l’échafaudage partiellement séché dans un puits frais. Semez une goutte de suspension MSC sur l’échafaudage.

De plus, ajoutez plus de média dans les coins du puits pour créer une chambre d’hydratation qui empêche l’évaporation du média de la goutte lors de l’incubation ultérieure. Incuber pour permettre aux CSM d’adhérer à la surface de l’échafaudage. Retournez l’échafaudage pour exposer la surface non ensemencée. Pipetez une goutte fraîche de suspension MSC de ce côté et laissez les MSC adhérer.

Une fois que les CSM ont adhéré aux deux côtés de l’échafaudage, couvrez-le avec plus de milieu en vous assurant que toutes les cellules sont en contact avec