Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
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L’imagerie in vivo du cancer du cerveau consiste à injecter des cellules cancéreuses marquées par fluorescence dans le cerveau de la souris pour observer le développement de la tumeur. Pour le marquage fluorescent, incubez des cellules de gliome avec des particules de lentivirus. Le vecteur lentiviral porte le gène de la protéine fluorescente infrarouge, iRFP.
Le virus se lie à la surface de la cellule du gliome et libère de l’ARN dans la cellule. Les enzymes cellulaires convertissent l’ARN viral en ADN double brin, qui s’intègre dans le génome cellulaire et permet l’expression de l’iRFP. Les maxima d’excitation et d’émission de l’iRFP se situent dans une région proche infrarouge où les tissus ont une absorbance et une diffusion minimales. Cela permet une imagerie précise des tissus profonds.
Ensuite, retirez le milieu épuisé et ajoutez de la trypsine. La trypsine, une enzyme protéase, digère les protéines d’adhésion, détachant les cellules de la surface du ballon. Pipeter à plusieurs reprises pour séparer les cellules individuelles. Recueillir la suspension cellulaire dans un tube et centrifuger. Maintenant, ajoutez un tampon approprié pour remettre le granulé en suspension.
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