Tomographie moléculaire à fluorescence : une technique d’imagerie pour l’imagerie in vivo de xénogreffes de glioblastome marquées par des protéines fluorescentes dans un modèle murin

La tomographie moléculaire à fluorescence ou FMT est une technique d’imagerie qui permet de déterminer la distribution des protéines fluorescentes présentes dans les tumeurs. Pour effectuer la FMT, commencez par prendre une souris anesthésiée. Ce modèle de souris est conçu pour exprimer des protéines fluorescentes dans le proche infrarouge dans les cellules de glioblastome - les cellules cancéreuses du cerveau.

Maintenant, placez la souris en position couchée au centre d’une cassette d’imagerie. Fixez le couvercle de la cassette et insérez-le dans la station d’accueil d’un imageur FMT. Une fois à l’intérieur, identifiez une zone tumorale appropriée contenant des cellules de glioblastome marquées. La lumière proche infrarouge pénètre profondément à travers le tissu cérébral pour atteindre les cellules cibles.

Ces ondes lumineuses balaient toute la zone tumorale en plusieurs points. Par conséquent, les protéines fluorescentes dans les cellules du glioblastome produisent des signaux d’émission fluorescents. Ces signaux sont ensuite détectés par le système de transillumination par le haut, qui génère des images 2D de haute qualité à partir de divers endroits de la zone tumorale sélectionnée.

Enfin, utilisez les algorithmes du logiciel pour combiner ces images et reconstruire un modèle tomographique 3D qui indique la localisation de la tumeur dans le cerveau. Après la numérisation, retirez la souris de la cassette d’imagerie et laissez-la récupérer.

Pour imager les cellules injectées, placez l’animal receveur anesthésié dans la cassette d’imagerie d’un imageur de tomographie moléculaire à fluorescence - adaptateur de tête d’abord en position couchée, avec la tête au centre de la cassette. Avec la cassette fermée, serrez les boutons de réglage à 17 millimètres.

Lorsque l’animal est en sécurité, insérez la cassette dans la station d’accueil interne et ouvrez le logiciel de l’imageur et de l’analyseur. Dans la fenêtre « Onglet Expérimental », sélectionnez la « Base de données » et le « Groupe d’étude » appropriés et ouvrez la fenêtre « Onglet Scan ». Cliquez sur « Sélectionner le sujet » pour sélectionner le sujet à imager et sélectionnez le canal laser dans le panneau « Canal laser ».

Cliquez sur « Capturer » pour acquérir une image, puis cliquez et faites glisser le champ de numérisation dans l’image capturée pour identifier les emplacements sources. Cochez l’option « Ajouter à la file d’attente de reconstruction » et cliquez sur « Scanner » dans la fenêtre « Onglet Scanner ». Une fois le balayage terminé, retirez la cassette d’imagerie de la station d’accueil et remettez l’animal dans sa cage, avec surveillance, jusqu’à ce qu’il se rétablisse complètement.

Pour analyser les images dans le logiciel d’imagerie et d’analyse, ouvrez la fenêtre « Analyse » et cliquez sur le bouton « + » dans le panneau « Sélection de l’ensemble de données » pour charger l’ensemble de données et le sujet à analyser. Ensuite, utilisez l’icône ellipsoïde pour sélectionner la région qui vous intéresse et cliquez avec le bouton droit de la souris sur la colonne « Seuil » pour ajuster le seuil à 0 dans le panneau « Données statistiques ».