Co-culture de cellules de glioblastome sur des neurones à motifs : une technique pour surveiller la migration des cellules de glioblastome sur les neurones de l’hippocampe du rat in vitro

Le glioblastome possède des cellules souches qui migrent le long des voies axonales des neurones myélinisés pour envahir des endroits éloignés du cerveau. Pour récapituler la migration des cellules de glioblastome ou de GBM sur les neurones in vitro, commencez par prendre une lamelle de verre.

Activez la lamelle par traitement au plasma d’oxygène et amorcez-la avec un agent fonctionnalisant. Ce traitement facilite l’accès aux produits chimiques dans les étapes suivantes. Ajouter la solution pégylée à la lamelle et incuber. Cette solution recouvre la lamelle, empêchant l’adhésion des neurones à des endroits aléatoires.

Versez un polymère photoinitiateur sur la lamelle et montez-le dans la chambre d’imagerie. Placez la chambre sur la platine d’un microscope à fluorescence. Une fois à l’intérieur, l’éclairage UV active les molécules photo-initiatrices localement dans les zones désignées correspondant aux micromotifs visualisés.

Les molécules photo-initiatrices activées clivent la couche PEG sous-jacente, générant le motif souhaité. Maintenant, ajoutez la solution de laminine et incuber. La laminine - une glycoprotéine - se dépose à des endroits spécifiques où la couche de PEG a été él