Isolement et culture de péricytes cérébraux primaires : procédure d’isolement et de culture de péricytes à partir de capillaires cérébraux bovins sans contamination des cellules endothéliales

Dans le système nerveux central, les péricytes sont des cellules multifonctionnelles qui enveloppent les cellules endothéliales, qui forment la paroi cellulaire interne des capillaires. Les péricytes aident à réguler le flux sanguin et à maintenir l’homéostasie cérébrale.

Pour isoler les péricytes, commencez par prélever des capillaires de cerveau de bovin congelés dans un flacon. Après la décongélation, transférez le contenu dans un tube contenant le fluide souhaité. Centrifugeuse pour granuler les capillaires. Retirez le surnageant contenant du fluide de congélation. Remettez la pastille capillaire en suspension dans un milieu et ensemencez la suspension dans une fiole enrobée de protéines de matrice extracellulaire.

Incuber pour permettre aux capillaires d’adhérer à l’enrobage dans le ballon. Remplacez le support par un support contenant de l’héparine. En culture, l’enrobage protéique de la matrice extracellulaire favorise la migration des péricytes loin des fragments capillaires et la prolifération, tandis que l’héparine stimule la migration des cellules endothéliales.

Remplacez le support usagé par un support contenant de l’héparine. Au fil du temps, les péricytes projettent d