Isolement des capillaires cérébraux du cerveau humain : une méthode optimisée pour extraire les capillaires cérébraux du tissu cérébral humain

Les capillaires cérébraux sont un composant essentiel de la barrière hémato-encéphalique - une barrière semi-perméable qui permet un mouvement sélectif des solutés entre le sang et le cerveau. Pour isoler les capillaires cérébraux, commencez par du tissu cérébral humain frais. Retirez les méninges et coupez la matière blanche.

Coupez le tissu cérébral en fragments plus petits. Transférez les fragments dans un homogénéisateur contenant un tampon approprié et homogénéisez. L’homogénéisation désintègre les tissus, libérant des capillaires et des débris tissulaires dans la solution.

Transférez l’homogénat dans un tube frais et ajoutez un volume optimal d’un milieu à gradient de densité approprié. Centrifuger la solution pour granuler les capillaires. Un gradient de densité trop important ou trop faible entraîne un faible rendement capillaire. Retirez le surnageant.

Remettre le granule en suspension dans du sérum de bovin, de l’albumine ou un tampon supplémenté en BSA. La BSA stabilise les enzymes digestives et maintient l’intégrité structurelle des capillaires. Ensuite, filtrez la solution avec un filtre approprié pour éliminer les gros vaisseaux et les débris tissulaires.

Ensuite, fai