Transplantation orthotopique à long terme de cellules tumorales dans des embryons de poisson-zèbre : une méthode efficace pour délivrer des cellules tumorales dans le quatrième ventricule d’embryons de poisson-zèbre pour l’analyse à long terme du comportement des cellules tumorales

Lors d’une transplantation orthotopique, des cellules tumorales ou des tissus d’un donneur porteur d’une tumeur sont transplantés dans le tissu correspondant d’un receveur de la même espèce. Tout d’abord, préparez une suspension uniforme - dans un tampon approprié - de cellules tumorales cérébrales marquées par fluorescence prélevées sur un poisson-zèbre porteur d’une tumeur. À l’aide d’une fine pointe de chargement de gel, chargez cette suspension cellulaire dans une aiguille de micro-injection.

Ensuite, fixez l’aiguille chargée dans le support d’un micromanipulateur. Par la suite, transférez un embryon de poisson-zèbre anesthésié dans une plaque d’injection préfabriquée. Pour un accès facile lors de la micro-injection, positionnez l’embryon latéralement pour visualiser les ventricules céphaliques - un réseau de cavités remplies de liquide céphalo-rachidien dans le cerveau.

Ajustez l’extrémité de l’aiguille pour injecter la suspension de cellules tumorales dans le quatrième ventricule, la cavité en forme de losange du cerveau postérieur de l’embryon. Les cellules tumorales occupent l’espace creux à l’intérieur du ventricule. Rétractez l’aiguille. Transférez l’embryon dans une boît