Encyclopédie des expériences JoVE
Recherche sur le cancer
0 vues • 5:43 min • July 8th, 2025
Commencer l’électroporation en prenant une pipette en verre contenant la solution plasmidique souhaitée. Fixez-le à un porte-micropipette équipé d’une électrode en fil d’argent, en veillant à ce que l’électrode soit insérée dans la micropipette. Prenez une chambre d’électroporation contenant une section d’hippocampe ultramince immergée dans du liquide céphalo-rachidien artificiel.
Trempez l’électrode de terre dans le fluide présent dans la chambre pour l’électroporation ultérieure. Abaissez la pointe de la pipette dans la chambre d’électroporation et enregistrez la résistance de base. À l’aide d’un microscope, positionnez la pointe de la pipette près de la cellule cible. Une fois que la pipette est en contact avec la membrane neuronale, sa résistance augmente fortement.
Appliquez une pression d’air positive pour créer une petite invagination dans la membrane neuronale. Appliquez rapidement une légère aspiration pour pousser la membrane vers le haut, créant ainsi un joint lâche entre la pointe de la pipette et la membrane. Répétez ce processus quelques fois de plus pour conditionner la membrane et éviter la lyse cellulaire.
Après le conditionnement, appliquez une forte aspiration po
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