Dosage basé sur la luminescence pour évaluer la neurotoxicité des composés testés sur les neurones

L’excroissance des neurites – où les neurones développent des projections – est cruciale pour la fonction neuronale et la régénération.

Pour évaluer in vitro les effets neurotoxiques des composés d’essai favorisant l’excroissance des neurites, obtenir une suspension de cellules progénitrices neurales humaines, hNPC, dans un milieu de différenciation.

Ensemencez les cellules dans des puits à plaques multi-puits recouverts de poly-L-lysine et de laminine, facilitant l’attachement des cellules au fond du puits et favorisant la croissance cellulaire. Les constituants des milieux de différenciation favorisent la différenciation des hNPC en neurones.

Traitez un ensemble de puits avec un composé d’essai favorisant l’excroissance des neurites. Cela interagit avec les neurones dérivés de hNPC et peut induire la croissance des neurites, sans perturber les processus métaboliques cellulaires et la concentration ultérieure d’adénosine triphosphate, ATP - la principale source d’énergie cellulaire.

Ajoutez le réactif en une seule étape contenant des détergents, l’enzyme luciférase et le substrat de la luciférase, la luciférine et les inhibiteurs de l’ATPase ainsi que des ions magnésium, et mélang