Test de microréseau d’antigène viral pour détecter les isotypes d’anticorps dans le sérum contre l’antigène viral
Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 5:04 min • July 8th, 2025
Commencer le test de micropuce à antigène viral avec une lame de micropuce à antigène viral préparée.
La lame contient plusieurs tampons, chacun avec un seul réseau contenant des centaines d’antigènes purifiés de plusieurs souches virales imprimés sur des points disposés dans une grille. Chaque tache contient un seul type d’antigène adsorbé sur la surface microporeuse tridimensionnelle de nitrocellulose
.Fixez la glissière dans une chambre pour une manipulation facile lors des étapes suivantes. Ajoutez un tampon bloquant contenant des protéines qui se lient aux surfaces restantes de la lame pour empêcher la liaison non spécifique des anticorps à la surface.
Incuber la lame de micropuce avec du sérum humain dilué. Les isotypes d’anticorps dans le sérum, spécifiques des antigènes sur la lame, reconnaissent et se lient aux épitopes des antigènes.
Retirez le sérum. Lavez avec un tampon pour éliminer les anticorps et les protéines non liés sur la lame.
Ajoutez des mélanges d’anticorps secondaires conjugués à des points quantiques, chacun avec un point quantique différent. Les anticorps secondaires spécifiques à l’isotype se lient spécifiquement à l’isotype d’anticorps sérique correspond
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