Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 5:54 min • July 8th, 2025
La microscopie à fluorescence intravitale est utile pour étudier l’induction phototoxique de la formation d’un thrombus – un caillot sanguin – au niveau d’un site de lésion microvasculaire.
Commencez par prendre une souris anesthésiée sans poils injectée d’un polysaccharide phototoxique marqué au fluorophore. Placez la souris en position couchée sur une plate-forme chauffante pour maintenir la température physiologique pour une bonne circulation sanguine.
Placez la partie apicale de l’oreille sous un microscope à fluorescence intravitale. Lors de l’excitation avec la lumière, le fluorophore émet une fluorescence, ce qui permet de surveiller le flux sanguin microvasculaire. Augmentez l’intensité lumineuse pour induire la formation de thrombus.
Le fluorophore absorbe la lumière de haute intensité et réagit avec l’oxygène moléculaire pour générer des espèces réactives de l’oxygène. Ces molécules provoquent un stress oxydatif dans les cellules endothéliales, entraînant ainsi des lésions cellulaires et l’exposition de la matrice sous-endothéliale.
Les cellules endommagées libèrent des médiateurs thrombotiques qui font le pont entre le collagène exposé dans la matrice sous-endothéliale e
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