Isolement de lymphocytes à partir d'un patch de Peyer de souris

Les

patchs de Peyer, PP, agrégats de tissus lymphoïdes organisés dans la paroi de l’intestin grêle, contiennent des cellules immunitaires, notamment des lymphocytes B, des lymphocytes T, des cellules dendritiques et des macrophages.

Pour isoler les lymphocytes des PP de souris, commencez par une souris euthanasiée. Inciser la paroi abdominale, exposant la cavité péritonéale. Localisez le cæcum. Disséquez la jonction iléo-caecélectrique pour séparer le caecum de l’intestin grêle.

Exciser le mésentère et inciser l’intestin grêle au niveau du duodénum pour retirer l’intestin grêle de la cavité péritonéale. Placez l’intestin grêle dans une plaque multipuits contenant du milieu réfrigéré et rincez pour enlever les débris.

Positionnez l’intestin grêle avec le côté mésentérique vers le bas et humidifiez avec du milieu pour maintenir l’hydratation des tissus. Identifiez les PP - des agrégats multi-lobulés blancs sur le côté anti-mésentérique de la paroi intestinale.

Excise soigneusement les PP, à l’exclusion des tissus intestinaux environnants. Transférer dans un tube contenant du fluide. Incuber sous agitation constante. Cette étape d’agitation détache le mucus, les débris cellulaires et