Évaluation de la colite induite par des produits chimiques par l’analyse immunohistochimique de coupes de tissu du côlon

Chez la souris, la couche muqueuse du côlon est constituée de cellules immunitaires contenant une lamina propria, entourée d’un épithélium serré qui protège la muqueuse. Le traitement chimique au sulfate de sodium dextran perturbe les jonctions serrées, causant des dommages aux cellules épithéliales et permettant aux microbes luminaux de pénétrer dans la lamina propria.

La

reconnaissance microbienne dans le côlon déclenche la sécrétion de chimiokines, entraînant l’infiltration des cellules immunitaires et la libération de cytokines pro-inflammatoires. Cette réponse immunitaire exagérée entraîne une inflammation du côlon ou une colite.

Pour évaluer la colite induite par des produits chimiques, commencez par utiliser une lame de verre portant une section de tissu du côlon de souris fixe et prétraitée présentant une colite induite par des produits chimiques. Traitez la section avec un cocktail d’anticorps primaires spécifiques aux récepteurs des cellules immunitaires qui se lient à leurs cellules immunitaires respectives.

Laver pour éliminer les anticorps non liés. Incuber la section de tissu avec des anticorps secondaires biotinylés, qui se lient spécifiquement aux anticorps primaire