Microscopie intravitale pour analyser les interactions cellules sanguines-endothéliales dans un modèle murin d’inflammation

Commençons avec une souris anesthésiée à laquelle on a injecté par voie intrapéritonéale du lipopolysaccharide pour induire une inflammation.

Inciser l’abdomen pour exposer la cavité abdominale. Maintenez l’hydratation des organes avec une solution saline. Injecter la rhodamine 6G de manière rétro-orbitale. Les molécules de colorant fluorescent entrent dans la circulation et marquent les leucocytes et les plaquettes pour leur visualisation.

Maintenant, extériorisez une boucle d’iléon avec ses vaisseaux mésentères. Gardez les tissus hydratés avec une solution saline préchauffée pour une imagerie optimale. Sous un microscope à fluorescence, focus sur une veine de mésentère pour la microscopie intravitale.

L’injection de lipopolysaccharides provoque l’activation des cellules endothéliales avec la régulation positive des molécules d’adhésion, y compris les sélectines. Les plaquettes circulantes sont recrutées dans l’endothélium, où elles se lient via des interactions molécule-ligand d’adhésion spécifiques, formant des complexes d’adhésion.

En raison de ces interactions, les plaquettes s’activent et libèrent des granules contenant des molécules, dont la sérotonine, favorisant le recrute