Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:45 min • July 8th, 2025
Prenez une émulsion adjuvante contenant des glycoprotéines d’oligodendrocytes de myéline, ou MOG - une protéine de gaine de myéline nerveuse et Mycobacterium tuberculosis inactivé. Injectez-le par voie sous-cutanée dans le dos de la souris.
Ensuite, injectez par voie intrapéritonéale des exotoxines dérivées de bactéries, perturbant la barrière hémato-encéphalique.
La mycobactérie injectée par voie sous-cutanée imite l’infection locale, attirant les cellules immunitaires, y compris les cellules présentatrices d’antigènes ou APC.
Les APC interagissent avec les MOG, les traitent et les présentent sur les grands complexes d’histocompatibilité, les CMH.
Les APC activés migrent vers les ganglions lymphatiques, où les lymphocytes T interagissent avec les APC, devenant des lymphocytes T autoréactifs.
Ces lymphocytes T pénètrent dans la circulation sanguine, traversent la barrière et s’infiltrent dans le système nerveux central, le SNC.
Dans le SNC, les lymphocytes T autoréactifs interagissent avec les cellules exprimant MOG, favorisant l’infiltration des cellules immunitaires.
Les monocytes infiltrés se différencient en macrophages, libérant des cytokines inflammatoires et des espèces réactives de l’oxygène, provoquant la mort cellulaire des oligodendrocytes producteurs de myéline.
Les lymphocytes B interagissent avec les lymphocytes T autoréactifs, se différenciant en plasmocytes et sécrétant des auto-anticorps contre la MOG, entraînant une dégradation de la gaine de myéline.
La démyélinisation altère la transmission du signal nerveux, induisant une encéphalomyélite auto-immune.
Commencez par injecter par voie sous-cutanée à des souris femelles âgées de 10 à 13 semaines 200 microgrammes de glycoprotéine oligodendrocytaire de myéline, émulsionnée dans 200 microlitres d’adjuvant de Freund complet contenant 400 microgrammes de Mycobacterium tuberculosis. Immédiatement, et 24 heures plus tard, injectez par voie intrapéritonéale aux souris 0,2 microgramme de toxine coqueluche dans 200 microlitres de PBS.
Il est essentiel que les souris aient été adaptées à la fois à la manipulation et à l’environnement expérimental avant l’induction pour éviter d’induire un stress, ce qui peut empêcher le développement de symptômes cliniques.
Une semaine après l’injection, examinez les souris tous les jours pour détecter les symptômes cliniques décrits dans le tableau.